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目的
探讨淫羊藿甙调节MC3T3-E1成骨细胞增殖分化过程中雌激素受体途径及与之关联的MAPK信号的作用。
方法用不同浓度淫羊藿甙处理MC3T3-E1成骨细胞不同时间，观察细胞活性、细胞周期相关蛋白表达及ERK、P38和JNK蛋白磷酸化的改变，然后用MAPK通路的抑制剂与淫羊藿甙联合或单独处理细胞，观察MAPK通路在淫羊藿甙对成骨细胞增殖中的作用。用碱性磷酸酶活性和茜素红矿化结节染色评价淫羊藿甙对MC3T3-E1成骨细胞成熟和矿化的影响，并用ICI182780和Nilutamide与淫羊藿甙共同处理MC3T3-E1成骨细胞，实时PCR检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原和骨钙素(osteocalcin)基因的表达。
结果淫羊藿甙浓度依赖性促进MC3T3-E1成骨细胞的活性，可上调cyclin E和PCNA并下调Cdkn2b的表达。U0126和SP600125可减弱淫羊藿甙对成骨细胞活性和基因表达的调节。淫羊藿甙可快速激活ERK和JNK信号(5 min内)，但不改变P38信号的磷酸化，ICI182780可部分抑制淫羊藿甙对ERK和JNK信号的激活。淫羊藿甙能上调成骨细胞中碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原和骨钙素基因的表达，并促进矿化结节的形成，ICI182780可以部分阻断淫羊藿甙的促分化和矿化作用。
结论淫羊藿甙可快速激活成骨细胞中ERK和JNK信号而影响细胞周期相关蛋白基因的表达，进而促进成骨细胞的增殖，且可部分通过雌激素受体信号促进成骨细胞的分化和矿化。