杧果乙烯受体基因MiETR1b的分离与表达分析

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以‘紫花杧’杧果(Mangifera indica L.‘Zihua’)子叶切段为材料,采用RT-PCR结合RACE方法得到乙烯受体基因ETR1的c DNA及基因组DNA全长,命名为Mi ETR1b。该基因c DNA全长2 530 bp,开放读码框为2 220 bp,编码739个氨基酸;其基因组DNA全长4 116 bp,其中从起始密码子到终止密码子为3 305 bp,含有6个外显子和5个内含子。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示Mi ETR1b与Mi ETR1亲缘关系最近,与Cs ERS1、Dl ETR1、Tc ERS1、Ptr ETR1有较高的同源性,且具有保守的GAF域和组氨酸激酶域。这些结果表明,Mi ETR1b为ETR1家族同源基因。荧光定量PCR结果表明,Mi ETR1b在杧果子叶切段不定根形成过程中在远轴端和近轴端都有表达,其中远轴端0.25~2 d的表达量显著上调;吲哚丁酸(IBA)和2,3,5–三碘苯甲酸(TIBA)预处理后分别在1 d和6 h显著下调。另一方面,在培养的初期,即0.5~1 d,乙烯释放量相对较高,4 d及其以后的乙烯释放量急剧下降,表明杧果子叶切段不定根形成过程中有较多乙烯生成,提示Mi ETR1b可能参与了不定根的形成。
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