【摘 要】
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目的 探讨鱼藤素联合喜树碱对宫颈癌HeLa细胞自噬、凋亡及PI3K/Akt通路的影响。方法 以不同浓度鱼藤素(0、10、100、500、1 000 nmol·L-1)、喜树碱(0、1、5、10、50μmol·L-1)及联合干预处理HeLa细胞48 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖情况。将细胞分为对照组、鱼藤素组(100 nmol·L-1)、喜树碱组(5μmol·L-1)、联合干预组(100 nm
【基金项目】
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江苏省高校自然科学研究面上项目（17KJB360002）；
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目的 探讨鱼藤素联合喜树碱对宫颈癌HeLa细胞自噬、凋亡及PI3K/Akt通路的影响。方法 以不同浓度鱼藤素(0、10、100、500、1 000 nmol·L-1)、喜树碱(0、1、5、10、50μmol·L-1)及联合干预处理HeLa细胞48 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖情况。将细胞分为对照组、鱼藤素组(100 nmol·L-1)、喜树碱组(5μmol·L-1)、联合干预组(100 nmol·L-1鱼藤素+5μmol·L-1喜树碱)、联合干预+LY294002组(100 nmol·L-1鱼藤素+5μmol·L-1喜树碱+5μg·mL-1PI3K特异性抑制剂LY294002)，分别进行相应干预48 h。采用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡情况；采用透射电镜观察HeLa细胞自噬小体；Western Blot法检测HeLa细胞中凋亡、自噬及PI3K/Akt通路相关蛋白的表达。构建HeLa移植瘤裸鼠模型，分为对照组、鱼藤素组(10 mg·kg-1)、喜树碱组(6 mg·kg-1)、联合干预组(10 mg·kg-1鱼藤素+6 mg·kg-1喜树碱)及联合干预+LY294002组(10 mg·kg-1鱼藤素+6 mg·kg-1喜树碱+6 mg·kg-1LY294002)，连续干预21 d后检测肿瘤质量并计算抑瘤率。结果 HeLa细胞增殖抑制率随鱼藤素和喜树碱浓度的增加而明显增加（P＜0.05），联合干预组的细胞增殖抑制率明显高于鱼藤素、喜树碱单独处理组。与对照组相比，鱼藤素组、喜树碱组的HeLa细胞凋亡率明显升高（P＜0.05），自噬小体数量明显增加（P＜0.05）,Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3II/LC3I蛋白表达明显上调（P＜0.05）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达明显下调（P＜0.05）,HeLa移植瘤裸鼠肿瘤质量明显降低（P＜0.05），抑瘤率明显升高。分别与鱼藤素组或喜树碱组相比，联合干预组的HeLa细胞凋亡率明显升高（P＜0.05），自噬小体数量明显增加（P＜0.05）,Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3II/LC3I蛋白表达明显上调（P＜0.05）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达明显下调（P＜0.05）,HeLa移植瘤裸鼠肿瘤质量明显降低（P＜0.05），抑瘤率明显升高。与联合干预组相比，联合干预+LY294002组的HeLa细胞凋亡率明显升高（P＜0.05），自噬小体数量明显增加（P＜0.05）,Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3II/LC3I蛋白表达明显上调（P＜0.05）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达明显下调（P＜0.05）,HeLa移植瘤裸鼠肿瘤质量明显降低（P＜0.05），抑瘤率明显升高。结论 鱼藤素联合喜树碱可能通过抑制PI3K/Akt通路促进HeLa细胞自噬和凋亡，并抑制肿瘤生长。
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