【摘 要】
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根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一条TaqMAN荧光探针,建立了巢式-多重RT-Realtime PCR检测PVYn的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术。实验结果表明,本方法检测的准确性和灵敏度比巢武PCR、单重Real time PCR等方法高,检测限可达3fg/μL植物总RNA。利用四对引物和一条TaqMA
【机 构】
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烟台出入境检验检疫局 山东烟台 264000
【出 处】
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2010年进出境植物检疫学术研讨会
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根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一条TaqMAN荧光探针,建立了巢式-多重RT-Realtime PCR检测PVYn的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术。实验结果表明,本方法检测的准确性和灵敏度比巢武PCR、单重Real time PCR等方法高,检测限可达3fg/μL植物总RNA。利用四对引物和一条TaqMAN探针对PCR阳性产物进行确认,检测的准确性比其它方法高。
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