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1、概述
牛结节性皮肤病（lumpy skin disease，LSD） 又被称为牛疙瘩皮肤病、牛结节性皮炎和牛结节疹，是牛结节性皮肤病病毒（lumpy skin disease virus，LSDV）感染引起牛的一种急性、亚急性或慢性传染病。世界动物卫生组织（WHO）將其列为法定报告的动物疫病，我国农业农村部暂时将其作为二类动物疫病管理，并采取相应的防控措施。该病首次于1929年在赞比亚发现，主要在非洲国家呈地方流行[1]。2013年以后席卷以色列、伊朗、巴勒斯坦、约旦、也门等中东国家[2]。2015年先后在希腊、俄罗斯、哈萨克斯坦、土耳其、保加利亚、马其顿、塞尔维亚、黑山、阿尔巴尼亚和科索沃等欧洲国家流行[3]。2019年8月12日我国首次确诊在新疆维吾尔自治区伊犁州大规模暴发牛结节性皮肤病疫情，给我国养牛业造成严重经济损失[4]。目前该病已在我国周边印度、尼泊尔、不丹等东南亚国家流行[5]。我国于2020年12月发布了《牛结节性皮肤病诊断技术》国家标准，对各级兽医人员防控该病具有一定的参考和指导意义。由于该病为外来新发传染病，我国对该病临床研究和诊疗经验均较少，出现疫情时不能及时发现和确诊，导致疫情蔓延。为了更好的预防和控制LSD疫情对我国养牛业造成的严重经济损失，本文对牛结节性皮肤病临床症状及可能的感染时间进行归纳和总结，以提高牧场、养殖场和各级兽医人员对该病的了解和认识，为该病的流行病学调查和疫源追踪提供有效信息，也为及时发现疫情和应急处置赢得时间。
2、临床症状
LSDV对所有品种、性别、不同年龄的牛均易感，尤其对高产奶牛的感染症状更加严重。除了感染牛和水牛外，还能感染长颈鹿、黑斑羚、羚羊、跳羚等野生动物。本病的感染率可达5%～45%，有急性、亚急性和慢性不同形式，死亡率一般低于10%，感染耐过动物最终能够清除体内的病毒。
LSDV主要在上皮细胞内复制，结节多出现于头、颈、胸、背、口腔黏膜、呼吸道、生殖系统以及各种脏器组织的表面，有时波及全身。不同动物的LSD临床症状有所差异，有的动物为重症感染，症状明显，有的动物感染后症状较轻，而有的动物感染则没有可见的临床症状。临床上首先能够观察到动物出现流泪和流鼻涕，浅表淋巴结肿大，如肩胛下和股前淋巴结肿大且易于触及。在病毒感染后4～7天出现高烧，体温高达40.5℃，伴随精神沉郁、不愿运动和食欲下降，高烧现象可能会持续大约1～2周，产奶量急剧下降。通常在高烧后48小时出现皮肤结节现象，通常在头、颈部、乳房、会阴、生殖器、四肢等部位出现。口腔和鼻腔粘膜中的坏死斑导致脓性或粘液性鼻涕和过多的唾液，此时分泌物含有高浓度的病毒，传染性很强。
LSDV导致的皮肤病变会随着病程的发展而发生变化，首先表现为凸起的结节，然后在结节顶部形成痂，之后痂脱落或被擦掉，留下未愈合的溃疡，最后溃疡愈合留下疤痕。国外学者通过实验室感染牛后不同时间内病变进展情况如图1所示[6]。通过实验室感染，获得LSD从感染到出现结节病变以及溃疡愈合过程所需的大致时间，可以估计LSDV首次感染动物的可能时间，这些信息有助于流行病学调查，并可用于追踪疫病来源和传播的潜在途径。在一群动物中首先要重点关注第一头出现皮肤病变的动物，在同一动物不同部位的结节出现的时间不一样，此时要重点关注最老的结节病变，才能正确估计首次感染的时间。
A为感染后7天：第一个皮肤结节开始出现，此时不能将它们确定为LSDV感染病变，有可能是昆虫叮咬等而引起。在1～2天后，小结节迅速出现，大小和数量不断增加。
B为感染后11天：受感染的动物可能会出现多个结节，但病灶中心尚未开始脱落。
C为感染后14天：病变周围有一个明显的圆圈，圆圈内开始形成结痂。
D为感染后19天：皮损顶部已形成结痂。
E为感染后21-26天：结痂脱落，形成新鲜的溃疡。
F为感染后27天以上：结痂脱落后，溃疡变干并迅速形成疤痕愈合，当观察到疤痕时，感染至少已经有1个月或更长时间。
3、鉴别诊断：
牛结节性皮肤病重症病例的症状特征非常明显，但对于感染初期或轻症感染的动物则较难诊断，需要和伪牛结节性皮肤病、昆虫叮咬、荨麻疹和光敏反应、假牛痘（副痘病毒）、皮肤癣菌病、蠕形螨病、牛丘疹性口炎等疾病鉴别诊断[7]。因此，对于可疑病例需要采集典型病料，送到指定的参考实验室进一步确诊。
伪牛结节性皮肤病：该病由牛疱疹病毒2型感染引起，皮肤病变可能与LSDV引起的病变相似，但结节更浅、病程更短、症状更轻，可通过PCR检测LSDV即可排除本病。
昆虫叮咬、荨麻疹和光敏反应：皮肤病变可能看起来像那些由 LSDV 引起，但更肤浅，病程更短，不太严重。通过PCR检测LSDV可以排除该疾病。
假牛痘（副痘病毒）：病变仅发生在乳头和乳房上。这可以通过 PCR 检测 LSDV 来排除疾病。
皮肤癣菌病：早期癣病灶，更肤浅，明显不同，癣病灶的非溃疡性表面结构。
蠕形螨病：主要在马肩隆、颈部、背部和背部的皮肤病变侧腹，常有脱毛。使用皮肤刮屑检测螨虫即可排除本病。
牛丘疹性口炎（副痘病毒）：病变仅发生在黏液中口腔膜。该疾病可以通过 PCR 检测排除。
4、临床样品采集：
由于LSDV在上皮细胞复制，通常在病变部位的皮肤或结节中病毒含量较高;病毒还可在口腔粘膜或鼻腔粘膜复制，因此唾液和鼻腔分泌物也含有病毒。在病毒血症阶段血液中也可检测到病毒，但是一般病毒血症持续的时间较短，轻症感染的动物病毒血症的水平较低。在感染后2周或临床症状出现后1周，就可以在血液中检测到抗体，在感染后3～4周或者临床症状出现后2～3周，体内抗体达到最高水平。因此，LSD的诊断可以检测病毒，也可以检测血清中的抗体。病原检测时，采集病损的皮肤和结痂可用于病毒核酸检测和病毒分离培养。在采集血液样品时，含有EDTA抗凝管的血样用于PCR检测，含有肝素抗凝管的血样用于病毒分离。由于病毒感染后14～21天就能够产生中和抗体，因此感染后期的血液样品不适合病毒分离。唾液和鼻腔分泌物适合于PCR检测。分离的血清可通过ELISA检测是否含有LSDV的抗体或者进行病毒中和试验进行确诊。 一旦發现可疑动物，首先要采取隔离措施，把患病动物和健康动物分开饲养。在样品采集时工作人员要穿生物防护服，并带防护手套，每一头动物要更换手套和所用的器具，以免交叉污染。在群体动物出现感染，最少采集5头具有代表性临床症状的动物样品用于送检，每个部位的样品最好采集2份，1份样品用于送检，另一方样品作为原始材料保存。为了保证样品的质量，寄送样品必须保持冷链运输，最好尽快送到有关实验室。对于血液和组织样品，如果用于分子生物学检测，在-20℃运输即可;如果用于病毒分离需要在-80℃运输和保存。
小结：LSD是一种病毒性传染病，它能通过蚊蝇等节肢昆虫叮咬传播，病牛是主要的传染源，一旦发现可疑动物，首先要限制动物的流动，禁止长途运输。做到早发现、早送检、早确诊，根据LSDV感染后不同时间所表现的临床症状特点推导动物感染的大概时间，制定科学的流行病学调查方案，启动相关应急计划，并及时采取相关防控措施将疫情控制在最小范围，降低疫病引起的各类损失。
参考文献：
[1]FAO.（2013）.Emergence of lumpy skin disease in the Eastern Mediterranean Basin countries.EMPRES WATCH，Vol.29，November 2013.Rome.
[2]Alkhamis，M.A.，& VanderWaal，K.（2016）.Temporal Epidemiology o f Lumpy Skin Disease in the Middle East，2012–2015.Frontiersin Veterinary Science，3，2012–2015.
[3]Gustavo Machado，Fedor Korennoy，Julio Alvarez，etc，Mapping changes in the spatiotemporal distribution of lumpy skin disease virus，Transbound Emerg Dis.2019; 66：2045–2057.
[4]Lu G，Xie J，Luo J，Shao R，Jia K，Li S.Lumpy skin disease outbreaks in China，since 3 August 2019.Transbound Emerg Dis.2020; 00：1–4.
[5]Xavier Roche，Andriy Rozstalnyy，Damian TagoPacheco，etc，Introduction and spread of lumpy skin disease in South，East and Southeast Asia，FAO ANIMAL PRODUCTION AND HEALTH / PAPER 183.
[6]Kumar N，Chander Y，Kumar R，Khandelwal N，Riyesh T，Chaudhary K，et al.（2021），Isolation and characterization of lumpy skin disease virus from cattle in India.PLoS ONE 16（1）：e0241022.
[7]Tuppurainen，E.，Alexandrov，T.& Beltrán-Alcrudo，D.2017.Lumpy skin disease field manual –A manual for veterinarians.FAO Animal Production and Health Manual No.20.Rome.Food and Agriculture Organization of the United Nations （FAO）.60 pages.
牛结节性皮肤病（lumpy skin disease，LSD） 又被称为牛疙瘩皮肤病、牛结节性皮炎和牛结节疹，是牛结节性皮肤病病毒（lumpy skin disease virus，LSDV）感染引起牛的一种急性、亚急性或慢性传染病。世界动物卫生组织（WHO）將其列为法定报告的动物疫病，我国农业农村部暂时将其作为二类动物疫病管理，并采取相应的防控措施。该病首次于1929年在赞比亚发现，主要在非洲国家呈地方流行[1]。2013年以后席卷以色列、伊朗、巴勒斯坦、约旦、也门等中东国家[2]。2015年先后在希腊、俄罗斯、哈萨克斯坦、土耳其、保加利亚、马其顿、塞尔维亚、黑山、阿尔巴尼亚和科索沃等欧洲国家流行[3]。2019年8月12日我国首次确诊在新疆维吾尔自治区伊犁州大规模暴发牛结节性皮肤病疫情，给我国养牛业造成严重经济损失[4]。目前该病已在我国周边印度、尼泊尔、不丹等东南亚国家流行[5]。我国于2020年12月发布了《牛结节性皮肤病诊断技术》国家标准，对各级兽医人员防控该病具有一定的参考和指导意义。由于该病为外来新发传染病，我国对该病临床研究和诊疗经验均较少，出现疫情时不能及时发现和确诊，导致疫情蔓延。为了更好的预防和控制LSD疫情对我国养牛业造成的严重经济损失，本文对牛结节性皮肤病临床症状及可能的感染时间进行归纳和总结，以提高牧场、养殖场和各级兽医人员对该病的了解和认识，为该病的流行病学调查和疫源追踪提供有效信息，也为及时发现疫情和应急处置赢得时间。
2、临床症状
LSDV对所有品种、性别、不同年龄的牛均易感，尤其对高产奶牛的感染症状更加严重。除了感染牛和水牛外，还能感染长颈鹿、黑斑羚、羚羊、跳羚等野生动物。本病的感染率可达5%～45%，有急性、亚急性和慢性不同形式，死亡率一般低于10%，感染耐过动物最终能够清除体内的病毒。
LSDV主要在上皮细胞内复制，结节多出现于头、颈、胸、背、口腔黏膜、呼吸道、生殖系统以及各种脏器组织的表面，有时波及全身。不同动物的LSD临床症状有所差异，有的动物为重症感染，症状明显，有的动物感染后症状较轻，而有的动物感染则没有可见的临床症状。临床上首先能够观察到动物出现流泪和流鼻涕，浅表淋巴结肿大，如肩胛下和股前淋巴结肿大且易于触及。在病毒感染后4～7天出现高烧，体温高达40.5℃，伴随精神沉郁、不愿运动和食欲下降，高烧现象可能会持续大约1～2周，产奶量急剧下降。通常在高烧后48小时出现皮肤结节现象，通常在头、颈部、乳房、会阴、生殖器、四肢等部位出现。口腔和鼻腔粘膜中的坏死斑导致脓性或粘液性鼻涕和过多的唾液，此时分泌物含有高浓度的病毒，传染性很强。
LSDV导致的皮肤病变会随着病程的发展而发生变化，首先表现为凸起的结节，然后在结节顶部形成痂，之后痂脱落或被擦掉，留下未愈合的溃疡，最后溃疡愈合留下疤痕。国外学者通过实验室感染牛后不同时间内病变进展情况如图1所示[6]。通过实验室感染，获得LSD从感染到出现结节病变以及溃疡愈合过程所需的大致时间，可以估计LSDV首次感染动物的可能时间，这些信息有助于流行病学调查，并可用于追踪疫病来源和传播的潜在途径。在一群动物中首先要重点关注第一头出现皮肤病变的动物，在同一动物不同部位的结节出现的时间不一样，此时要重点关注最老的结节病变，才能正确估计首次感染的时间。
A为感染后7天：第一个皮肤结节开始出现，此时不能将它们确定为LSDV感染病变，有可能是昆虫叮咬等而引起。在1～2天后，小结节迅速出现，大小和数量不断增加。
B为感染后11天：受感染的动物可能会出现多个结节，但病灶中心尚未开始脱落。
C为感染后14天：病变周围有一个明显的圆圈，圆圈内开始形成结痂。
D为感染后19天：皮损顶部已形成结痂。
E为感染后21-26天：结痂脱落，形成新鲜的溃疡。
F为感染后27天以上：结痂脱落后，溃疡变干并迅速形成疤痕愈合，当观察到疤痕时，感染至少已经有1个月或更长时间。
3、鉴别诊断：
牛结节性皮肤病重症病例的症状特征非常明显，但对于感染初期或轻症感染的动物则较难诊断，需要和伪牛结节性皮肤病、昆虫叮咬、荨麻疹和光敏反应、假牛痘（副痘病毒）、皮肤癣菌病、蠕形螨病、牛丘疹性口炎等疾病鉴别诊断[7]。因此，对于可疑病例需要采集典型病料，送到指定的参考实验室进一步确诊。
伪牛结节性皮肤病：该病由牛疱疹病毒2型感染引起，皮肤病变可能与LSDV引起的病变相似，但结节更浅、病程更短、症状更轻，可通过PCR检测LSDV即可排除本病。
昆虫叮咬、荨麻疹和光敏反应：皮肤病变可能看起来像那些由 LSDV 引起，但更肤浅，病程更短，不太严重。通过PCR检测LSDV可以排除该疾病。
假牛痘（副痘病毒）：病变仅发生在乳头和乳房上。这可以通过 PCR 检测 LSDV 来排除疾病。
皮肤癣菌病：早期癣病灶，更肤浅，明显不同，癣病灶的非溃疡性表面结构。
蠕形螨病：主要在马肩隆、颈部、背部和背部的皮肤病变侧腹，常有脱毛。使用皮肤刮屑检测螨虫即可排除本病。
牛丘疹性口炎（副痘病毒）：病变仅发生在黏液中口腔膜。该疾病可以通过 PCR 检测排除。
4、临床样品采集：
由于LSDV在上皮细胞复制，通常在病变部位的皮肤或结节中病毒含量较高;病毒还可在口腔粘膜或鼻腔粘膜复制，因此唾液和鼻腔分泌物也含有病毒。在病毒血症阶段血液中也可检测到病毒，但是一般病毒血症持续的时间较短，轻症感染的动物病毒血症的水平较低。在感染后2周或临床症状出现后1周，就可以在血液中检测到抗体，在感染后3～4周或者临床症状出现后2～3周，体内抗体达到最高水平。因此，LSD的诊断可以检测病毒，也可以检测血清中的抗体。病原检测时，采集病损的皮肤和结痂可用于病毒核酸检测和病毒分离培养。在采集血液样品时，含有EDTA抗凝管的血样用于PCR检测，含有肝素抗凝管的血样用于病毒分离。由于病毒感染后14～21天就能够产生中和抗体，因此感染后期的血液样品不适合病毒分离。唾液和鼻腔分泌物适合于PCR检测。分离的血清可通过ELISA检测是否含有LSDV的抗体或者进行病毒中和试验进行确诊。 一旦發现可疑动物，首先要采取隔离措施，把患病动物和健康动物分开饲养。在样品采集时工作人员要穿生物防护服，并带防护手套，每一头动物要更换手套和所用的器具，以免交叉污染。在群体动物出现感染，最少采集5头具有代表性临床症状的动物样品用于送检，每个部位的样品最好采集2份，1份样品用于送检，另一方样品作为原始材料保存。为了保证样品的质量，寄送样品必须保持冷链运输，最好尽快送到有关实验室。对于血液和组织样品，如果用于分子生物学检测，在-20℃运输即可;如果用于病毒分离需要在-80℃运输和保存。
小结：LSD是一种病毒性传染病，它能通过蚊蝇等节肢昆虫叮咬传播，病牛是主要的传染源，一旦发现可疑动物，首先要限制动物的流动，禁止长途运输。做到早发现、早送检、早确诊，根据LSDV感染后不同时间所表现的临床症状特点推导动物感染的大概时间，制定科学的流行病学调查方案，启动相关应急计划，并及时采取相关防控措施将疫情控制在最小范围，降低疫病引起的各类损失。
参考文献：
[1]FAO.（2013）.Emergence of lumpy skin disease in the Eastern Mediterranean Basin countries.EMPRES WATCH，Vol.29，November 2013.Rome.
[2]Alkhamis，M.A.，& VanderWaal，K.（2016）.Temporal Epidemiology o f Lumpy Skin Disease in the Middle East，2012–2015.Frontiersin Veterinary Science，3，2012–2015.
[3]Gustavo Machado，Fedor Korennoy，Julio Alvarez，etc，Mapping changes in the spatiotemporal distribution of lumpy skin disease virus，Transbound Emerg Dis.2019; 66：2045–2057.
[4]Lu G，Xie J，Luo J，Shao R，Jia K，Li S.Lumpy skin disease outbreaks in China，since 3 August 2019.Transbound Emerg Dis.2020; 00：1–4.
[5]Xavier Roche，Andriy Rozstalnyy，Damian TagoPacheco，etc，Introduction and spread of lumpy skin disease in South，East and Southeast Asia，FAO ANIMAL PRODUCTION AND HEALTH / PAPER 183.
[6]Kumar N，Chander Y，Kumar R，Khandelwal N，Riyesh T，Chaudhary K，et al.（2021），Isolation and characterization of lumpy skin disease virus from cattle in India.PLoS ONE 16（1）：e0241022.
[7]Tuppurainen，E.，Alexandrov，T.& Beltrán-Alcrudo，D.2017.Lumpy skin disease field manual –A manual for veterinarians.FAO Animal Production and Health Manual No.20.Rome.Food and Agriculture Organization of the United Nations （FAO）.60 pages.