稳定表达NLRC5基因肝癌细胞株的建立

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目的 建立起能够稳定表达NLRC5基因的肝癌HepG2细胞株。方法 设计遗传霉素(G418)的浓度梯度,通过对HepG2细胞筛选最终确定筛选药物浓度。将构建好的人源pEGFP-C2-NLRC5重组质粒利用脂质体介导法转染至HepG2肝癌细胞株中,用G418筛选出耐药阳性克隆。通过免疫荧光技术观察绿色荧光蛋白稳定表达情况,Western blot法验证NLRC5蛋白表达情况。结果 G418在14d内使HepG2细胞全部死亡的最小浓度是300ng/ml。用G418筛选瞬转pEGFP-C2-NLRC514d在荧
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