黄连-厚朴配伍对溃疡性结肠炎模型大鼠的保护作用及对凋亡因子的影响

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:potato_212
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目的:研究不同剂量的单味黄连、厚朴及配伍对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠的保护作用及结肠B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)及炎性细胞因子等表达的影响.方法:将120只健康成年SD大鼠随机分为空白组,模型组,柳氮磺胺吡啶组,黄连2.00,1.00,0.50 g·kg-1组,厚朴2.00,1.00,0.50 g·kg-1组,黄连-厚朴配伍4.00,2.00,1.00 g·kg-1组,共12组,每组10只.采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇(TNBS/乙醇)制备UC模型,造模24 h后,均按10 mL·kg-1灌胃,1次/d,并观察造模后各组大鼠的精神、活动状态、毛发光泽、大便性状和便血情况;连续给药6d,末次给药24 h后取结肠组织和脾脏,计算结肠质量长度比和脾脏指数,根据结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分标准评价结肠损伤程度,采用苏木素-伊红(HE)染色进行组织病理学观察;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测空白组、模型组,优选的黄连2.00 g·kg-1组,厚朴2.00 g·kg-1组,黄连-厚朴配伍4.00 g·kg-1组血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10),髓过氧化物酶(MPO)的表达量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠结肠Bax,Caspase-3蛋白的表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠萎靡少动,结肠质量长度比、脾脏指数,CMDI,结肠组织病理损伤极显著增加,血清TNF-α,IL-6,MPO的表达量极显著升高,而血清IL-10表达水平则极显著降低(P<0.01);与模型组比较,柳氮磺胺吡啶组,黄连2.00,1.00 g·kg-1,厚朴2.00 g·kg-1,黄连-厚朴配伍3个剂量组大鼠结肠重量长度比,CMDI均明显降低(P<0.05,P<0.01),黄连0.50 g·kg-1组,厚朴0.50,1.00 g·kg-1组结肠质量长度比,CMDI指数与模型组差异无统计学意义,与黄连、厚朴0.50 g·kg-1组比较,黄连-厚朴配伍1.00 g·kg-1组结肠质量长度比极显著降低(P<0.01);与模型组比较,柳氮磺胺吡啶组,黄连2.00 g·kg-1,黄连-厚朴配伍4.00 g·kg-1组脾脏指数明显降低(P<0.05);与模型组比较,柳氮磺胺吡啶组,黄连2.00,1.00 g·kg-1,厚朴2.00 g·kg-1,黄连-厚朴配伍3个剂量组可明显改善组织病理学损伤、组织坏死的深度和范围;与模型组比较,优选的黄连2.00 g·kg-1组,厚朴2.00 g·kg-1组,黄连-厚朴配伍4.00 g·kg-1组血清TNF-α,IL-6,MPO的表达水平显著降低,血清IL-10的水平显著升高(P<0.01);与空白组比较,模型组结肠Bax,Caspase-3蛋白表达量显著升高(P<0.01),与模型组比较,优选的黄连2.00 g·kg-1组,厚朴2.00 g·kg-1组,黄连-厚朴配伍4.00 g·kg-1组结肠Bax,Caspase-3蛋白表达量显著降低(P<0.01).结论:单味黄连、厚朴及黄连-厚朴配伍可能通过下调Bax,Caspase-3蛋白的表达、抑制炎性细胞因子的释放和促进抗炎因子的释放而改善TNBS/乙醇诱导的UC模型大鼠的病理损伤,发挥保护结肠黏膜组织的作用,黄连与厚朴配伍效应有优于单味药、黄连有优于厚朴的趋势.
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