phyA基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

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利用自行筛选、鉴定的黑曲霉F246,根据植酸酶(phyA)基因成熟肽编码序列设计引物,直接PCR扩增phyA,经酶切分析、DNA测序分析证实phyA基因克隆成功。从pMD18T-phyA克隆中获得phyA编码序列,将其与pET30a^+质粒连接,构建pET30a^+-phyA重组质粒,并在大肠杆菌中获得了高效表达。重组质粒经IPTG诱导表达,SDS-PAGE特异区带分子量为50kDa,此重组蛋白占大肠杆菌可溶性蛋白的36.62%,酶活性较天然植酸酶高8倍以上。本研究为大量获得高活性植酸酶以及开发新型微生态
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