【摘 要】
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目的:通过酵母真核表达系统获得鸡α干扰素,并鉴定其抗病毒生物活性。方法:以ConA刺激4~10小时后的鸡全血淋巴细胞提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆出鸡α干扰素成熟蛋白基
【机 构】
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江苏大学食品与生物工程学院,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院,中国人民解放军73081部队农副业基地
【基金项目】
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江苏大学高级人才专项资助项目(编号:1283000152)
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目的:通过酵母真核表达系统获得鸡α干扰素,并鉴定其抗病毒生物活性。方法:以ConA刺激4~10小时后的鸡全血淋巴细胞提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆出鸡α干扰素成熟蛋白基因,通过EcoRI和XbaI两个酶切位点使该基因插入酵母表达载体(pPICZa-A),并把线性化该重组酵母鸡α干扰素载体,通过电转化使鸡α干扰素基因整和到酵母(X33)基因组上,利用微量病变抑制法测定表达的鸡α干扰素的抗病毒活性。结果:实验结果表明重组酵母鸡α干扰素活性单位为10×48U/ml,具有较好的抗病毒效果
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