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将长的基因表达序列标签（LongsAGE）和结合标签的基因序列延伸（GLGI）技术相结合，GLGI的方法进行改良。（1）将原始GLGI方法中正向引物中长为10bp的SAGE标签特异序列改为17bp的LongSAGE标签；（2）针对不同LongSAGE标签，在PCR反应中给定相应不同的退火温度；（3）在PCR反应中用普通的DNA聚合酶代替高保真酶（Pfu）：（4）在PCR反应的克隆中，使用普通的T载体和感受态细胞代替原始方法中特异的载体和感受态细胞。利用改良的GLGI方法分离的EST位于cDNA的3’末端并