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GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mjynht

【摘 要】

：

目的构建GST．LM01融合蛋白表达载体，并在原核细胞大肠埃希菌（E．coli）中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板，用PCR方法法扩增出LM01基因全长及各个截短突变体，通过BamHI和EcoRI酶切位

【作 者】

：

顾卉 佟宇鑫 刘彤 李慧 李丹妮 袁正伟 

【机 构】

：

中国医科大学附属盛京医院实验研究中心,中国医科大学基础医学院细胞生物教研室细胞生物学教育部、卫生部重点实验室,中国医科大学第94期临床医学系

【出 处】

：

中国医科大学学报

【发表日期】

：

2011年11期

【关键词】

：

LMO1 截短突变体 质粒 原核表达 LMO1   deletion mutants  plasmid  prokaryotic expression 

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30872705,30801242）

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目的构建GST．LM01融合蛋白表达载体，并在原核细胞大肠埃希菌（E．coli）中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板，用PCR方法法扩增出LM01基因全长及各个截短突变体，通过BamHI和EcoRI酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中，构建原核表达质粒pGEX-5x-2-LM01及其截短突变体，通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后，转入E．coliBL21中，经异丙基硫代B—D半乳糖苷诱导表达，SDS—PAGE和Westernblot鉴定。结果酶切电泳及测序结果证明，成功构建了原核表达质粒pG

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