探讨星形细胞上调基因－1(AEG－1)与microRNA－885－5p的关系，观察microRNA－885－5p对肝癌细胞MHCC－97H迁移和侵袭能力的影响，鉴定microRNA－885－5p的靶基因，揭示AEG－1促进肝癌转移的机制。
方法采用实验研究方法。构建AEG－1过表达质粒，合成沉默AEG－1的siRNA，分别瞬时转染进MHCC－97H细胞。对于转染质粒，以转染空载体Vector NC的MHCC－97H细胞作对照，设为A组；转染AEG－1过表达质粒的MHCC－97H细胞设为B组。对于转染AEG－1 siRNA，以转染阴性对照siRNA的MHCC－97H细胞作对照，设为C组；转染AEG－1 siRNA的MHCC－97H细胞设为D组。采用荧光定量PCR分别检测A、B、C、D组MHCC－97H细胞中microRNA－885－5p相对表达量。对于转染microRNA－885－5p模拟体，以转染阴性对照microRNA模拟体的MHCC－97H细胞作对照，设为E组；转染microRNA－885－5p模拟体的MHCC－97H细胞设为F组。采用Transwell小室法检测E、F组MHCC－97H细胞迁移和侵袭能力。采用Targetscan软件，预测microRNA－885－5p的靶基因。将靶基因报告质粒和阴性对照siRNA共转染进MHCC－97H细胞作对照，设为G组；将靶基因报告质粒和microRNA－885－5p模拟体共转染进MHCC－97H细胞，设为H组。将结合位点突变的靶基因报告质粒和阴性对照siRNA共转染进MHCC－97H细胞作对照，设为I组；将结合位点突变的靶基因报告质粒和microRNA－885－5p模拟体共转染进MHCC－97H细胞，设为J组。检测G、H、I、J组细胞荧光素酶活性。在MHCC－97H细胞中转染阴性对照siRNA，设为K组；转染microRNA－885－5p模拟体，设为L组，采用Western blot检测各组中microRNA－885－5p靶基因蛋白相对表达量。将microRNA－885－5p靶基因siRNA转染进MHCC－97H细胞，设为M组；将阴性对照siRNA转染进MHCC－97H细胞，设为N组。采用Transwell小室法检测M、N组MHCC－97H细胞迁移和侵袭能力。符合正态分布的计量资料以
±s表示，两组间比较采用t检验。
A组MHCC－97H细胞中microRNA－885－5p的相对表达量为(10.68±1.32)×10－4，B组为(5.02±0.20)×10－4，两组比较，差异有统计学意义(t＝7.357，P<0.05)。C组MHCC－97H细胞中microRNA－885－5p的相对表达量为(11.04±0.97)×10－4，D组为(24.15±3.71)×10－4，两组比较，差异有统计学意义(t＝5.920，P<0.05)。MHCC－97H细胞迁移实验结果：E组Transwell小室下层MHCC－97H细胞数目为(1 452±212)个，F组为(778±95)个，两组比较，差异有统计学意义(t＝5.018，P<0.05)。MHCC－97H细胞侵袭实验结果：E组Transwell小室下层MHCC－97H细胞数目为(1 237±238)个，F组为(470±70)个，两组比较，差异有统计学意义(t＝5.353，P<0.05)。预测到一条靶基因候选者为MMP9。G组MHCC－97H细胞荧光素酶活性为0.73±0.03，H组为0.46±0.04，两组比较，差异有统计学意义(t＝8.623，P<0.05)。检测到结合位点突变报告质粒mutMMP9。I组MHCC－97H细胞荧光素酶活性为0.69±0.03，J组为0.64±0.08，两组比较，差异无统计学意义(t＝0.934，P>0.05)。K组MHCC－97H细胞中MMP9蛋白相对表达量为0.75±0.03，L组为0.25±0.03，两组比较，差异有统计学意义(t＝19.086，P<0.05)。MHCC－97H细胞迁移实验结果：M组Transwell小室下层MHCC－97H细胞数目为(1 210±163)个，N组为(537±16)个，两组比较，差异有统计学意义(t＝7.111，P<0.05)。MHCC－97H细胞侵袭实验结果：M组Transwell小室下层MHCC－97H细胞数目为(1 192±170)个，N组为(374±55)个，两组比较，差异有统计学意义(t＝7.916，P<0.05)。
结论AEG－1负调控microRNA－885－5p的表达，microRNA－885－5p的靶基因为MMP9，micro－RNA－885－5p通过负调控MMP9，起到抑制肝癌细胞迁移和侵袭的作用。