人源VEGF单克隆抗体Fabμ和Fc5μ片段的制备

来源 :药物生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lh305879918
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用胰蛋白酶将Mt为900k的人源VEGFIgM单抗切成Fabμ和五聚的Fc片段(Fc5μ)。用Scphacryl S-200对分离纯化两片段.用间接ELISA法测定IgM抗体及Fabμ片段的抗原结合活忡。结果表明:按酶:IgM为1:30加入胰蛋白酶.63℃酶切30min.可使IgM水解完全。用Sephacryl S-200纯化后,片段纯度〉90%。经ELISA间接法测定Fabμ的抗原结合活性后发现.虽与完整的五聚体IgM相比亲和力有所下降.但仍有较好的抗原结合活性.相对亲和力为4.29×10^8
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