【摘 要】
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目的 探讨微小RNA(miR)-193a对糖尿病肾病(DN)足细胞凋亡的影响及作用机制.方法 通过体外高糖培养足细胞和体内小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DN模型,将细胞或60只小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、miR-193a抑制阴性对照组、miR-193a抑制组、miR-193a过表达阴性对照组和miR-193a过表达组.使用流式细胞术、免疫组织化学、免疫荧光、TUNEL、Real-time PCR和Western blotting检测DN小鼠和小鼠足细胞凋亡情况.结果 DN小鼠和高糖诱导的小鼠
【机 构】
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河北中医学院研究生学院,石家庄050200;河北省中医院肾病科,石家庄050011;河北医科大学第四医院内分泌科,石家庄050011
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目的 探讨微小RNA(miR)-193a对糖尿病肾病(DN)足细胞凋亡的影响及作用机制.方法 通过体外高糖培养足细胞和体内小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DN模型,将细胞或60只小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、miR-193a抑制阴性对照组、miR-193a抑制组、miR-193a过表达阴性对照组和miR-193a过表达组.使用流式细胞术、免疫组织化学、免疫荧光、TUNEL、Real-time PCR和Western blotting检测DN小鼠和小鼠足细胞凋亡情况.结果 DN小鼠和高糖诱导的小鼠足细胞中Nephrin、Podocin表达减弱,细胞凋亡率显著升高,miR-193a高表达,小鼠肾脏和足细胞中cleaved-Caspase-3和Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著下降,而miR-193a抑制剂(inhibitor)可改善这一过程.DN小鼠和高糖培养的小鼠足细胞中Wilms瘤基因1(WT1) mRNA和蛋白表达水平显著降低,miR-193a inhibitor干预后WT1蛋白表达显著升高.上调WT1可降低miR-193a对高糖诱导的小鼠足细胞凋亡的影响.双荧光素酶报告实验证实了miR-193a和WT1之间的靶向关系.结论 MiR-193a下调WT1的表达,促进DN足细胞凋亡.
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