【摘 要】
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目的:构建肌节同源盒基因1(Msx1)-Cre小鼠模型。方法:基于CRISPR/Cas9技术,设计靶向切割Msx1基因启动子下游的单链向导RNA(sgRNA),并构建包含Cre序列的同源重组片段;构建sgRN
【机 构】
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福建省发育与神经生物学重点实验室·,福建师范大学生命科学学院
【基金项目】
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福建省自然科学基金面上项目(2019J01281)
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目的:构建肌节同源盒基因1(Msx1)-Cre小鼠模型。方法:基于CRISPR/Cas9技术,设计靶向切割Msx1基因启动子下游的单链向导RNA(sgRNA),并构建包含Cre序列的同源重组片段;构建sgRNA载体质粒,转染至小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3),并在细胞水平验证sgRNA的打靶效率和脱靶情况;将靶向切割Msx1基因的sgRNA、Cre同源重组片段及Cas9蛋白等混合溶液经体外显微注射至C57BL/6J小鼠的受精卵,3周后获得小鼠,利用PCR技术鉴定获得的F0代Msx1-Cre小鼠,并将构建
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