【摘 要】
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目的:建立实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测心血管活性多肽的方法,为快速、准确地分析心脏组织中apelin基因表达奠定基础.方法:根据心血管活性多肽apelin基因序列,设计并合
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目的:建立实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测心血管活性多肽的方法,为快速、准确地分析心脏组织中apelin基因表达奠定基础.方法:根据心血管活性多肽apelin基因序列,设计并合成引物和荧光标记TaqMan探针.将逆转录-聚合酶链式反应扩增的apelin基因片段克隆至pGEM-T easy载体,重组质粒经蓝白筛选、酶切、测序鉴定后,作为阳性克隆标准品,用于标准曲线的制定,由此可定量检测出每一样品模板的起始拷贝数.结果:阳性克隆标准品制作的标准曲线可显示循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系(r=0.9
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