大肠杆菌K88ac菌毛操纵子fae全基因的克隆、表达及生物学活性初步研究

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目的:在体外克隆和表达猪肠产毒性大肠杆菌(ETEC)K88ae菌毛操纵子,触结构基因,并检测重组菌毛的相关生物学活性。方法:利用长PCR技术以猪ETECK88ae株C83902基因组DNA为模板扩增编码K88菌毛操纵子触基因,克隆入表达质粒载体pBR322,构建和筛选重组质粒pBR322-fae,转化至不含任何菌毛的大肠杆菌EP株;电镜观察重组菌表面菌毛表达情况;用热抽提法提纯表达的重组菌毛;用纯化菌毛免疫小鼠制备高效价抗血清;用SDS-PAGE和Western blot检测重组菌毛的抗原性,用细胞黏附和
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