【摘 要】
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谷胱甘肽是参与细胞活动的最普遍的非蛋白巯基化合物,是机体内重要的活性三肽,因其抗氧化作用而在医药、食品、化妆品等行业有着广泛的应用,生物合成是制备谷胱甘肽的主要方
【机 构】
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生物质化工教育部重点实验室浙江大学化学工程与生物工程系;
【基金项目】
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浙江省重点科技创新团队计划资助项目(2011R50002)
论文部分内容阅读
谷胱甘肽是参与细胞活动的最普遍的非蛋白巯基化合物,是机体内重要的活性三肽,因其抗氧化作用而在医药、食品、化妆品等行业有着广泛的应用,生物合成是制备谷胱甘肽的主要方法,一直引起广泛关注。近年来发现的双功能酶GshF可同时催化谷胱甘肽生物合成的两步反应,有望提高酶法催化产谷胱甘肽的效率,但该酶的酶学性质尚未得到充分研究。克隆了来自Streptococcus thermophilus的双功能酶基因gshF,并用大肠杆菌表达,研究表明,重组菌于37℃培养4 h后经0.1 mmol/L IPTG诱导,然后在30℃下表达,胞内酶活可达44 U/L。表达产物经破胞、离心、亲和层析等步骤分离纯化后,进一步考察了其相关酶学性质,结果表明,该酶最适pH为8.0,最适温度为37℃,还研究了其最适pH和温度下的稳定性。最终通过重组菌酶法催化合成谷胱甘肽得到的最高产量为2.11g/L。这些对该酶在谷胱甘肽生物合成上的应用有重要的借鉴作用。
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