肠膜明串珠菌ATCC8293是蔬菜发酵中的优势菌，具有较高生产乳酸和苯乳酸的活性。乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）是产生乳酸和苯乳酸的关键酶。本研究将LDH 克隆至载体pETDuet^TM-1，构建重组表达载体pETldh（6394 bp）并转化到E. coli BL21（DE3）中实现表达。经镍柱亲和层析得到较纯的重组LDH，进行酶学性质研究。结果表明，LDH酶的蛋白分子量为37 kDa, 最适pH为7.0，温度为 40℃。在最适酶活测定条件下，LDH酶的比活力为67.45 unit/mg, 也证实该酶是转化丙酮酸为D-乳酸的D-LDH。此外，LDH对丙酮酸和NADH的K_m分别为1.27 mM和0.48 mM，对丙酮酸的K_cat和K_cat/K_m分别为421 s^-1和3.31×105 M^-1s^-1。除了丙酮酸作为底物外，对草酰乙酸和苯丙酮酸也具有较强的催化能力。本研究结果对利用肠膜明串珠菌生产乳酸和苯乳酸提供理论依据。