丝状真菌米曲霉(Aspergillus oryzae)是发酵工业的重要菌株,具有强大的蛋白分泌能力和公认的食品安全性,可作为表达外源蛋白的细胞工厂。然而利用米曲霉分泌生产外源蛋白质常会受限于一些瓶颈问题:包括转录、翻译、蛋白质折叠、易位、降解、运输和分泌等。这些问题的存在导致了米曲霉外源蛋白生产很难达到预期的效果。近年来随着全基因组序列的破译,米曲霉生产相关基础研究以及基因工程技术都得到了较好的发展。如:提高同源重组效率、选择性标记基因应用技术、染色体大片段删除技术、菌丝融合技术、DNA芯片技术等。这些技术的开发和建立,为米曲霉工业生产应用提供了大量技术支持。本文针对米曲霉在外源表达蛋白中存在的瓶颈问题,主要通过以下几个方面进行了阐述:转化系统的优化和转化效率的提高、蛋白酶基因缺陷菌株的构建、融合表达策略、以及优化其外源表达系统来提高外源蛋白生产等。这些米曲霉生产相关基础研究以及基因工程技术的进步,很大程度上提高了米曲霉的生产应用,并为今后米曲霉生产菌株的育种提供了更多有效的途径和研究空间。