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目的
观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对人肝癌细胞株糖酵解的影响。
方法不同浓度3-BrPA处理人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞QSG-7701后,细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测HepG2和QSG-7701经过3-BrPA处理前后细胞内c-Myc、单羧酸转运蛋白1(MCT1) mRNA和蛋白表达,酶耦联法检测上述细胞葡萄糖吸收、乳酸分泌及细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量。
结果细胞存活和凋亡结果显示随3-BrPA浓度增加,细胞生长抑制率和凋亡率随之增高。不同浓度3-BrPA(25、50、75 μmol/L)处理HepG2细胞24 h后,凋亡率分别为(4.64±2.68)%、(14.57±8.41)%、(40.55±23.41)%,对照组0 μmol/L下HepG2凋亡率为(5.62±3.24)%,75 μmol/L组与对照组比较差异有统计学意义(P=0.025)。在mRNA和蛋白水平上,与QSG-7701比较,HepG2中c-Myc、MCT1均高表达(P=0.001、0.000),且当3-BrPA浓度为75 μmol/L时表达均下降(P=0.041、0.000)。糖代谢结果显示当3-BrPA浓度为75 μmol/L时HepG2的葡萄糖吸收、乳酸分泌及细胞内ATP含量均逐渐降低(P=0.035、0.000、0.045),而QSG-7701中无改变(P=0.898、0.841、0.112)。
结论3-BrPA通过抑制c-Myc/MCT1表达抑制HepG2的糖酵解,从而抑制HepG2细胞生长、促进细胞凋亡。