抗人AFP单链抗体的制备、鉴定及其免疫学活性的测定

来源 :肝胆胰外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：QQ343282482

【摘要】

：

目的构建具有免疫学活性的抗人甲胎蛋白单链抗体ScFv（single chain fragment of variety region,ScFv）,为进一步的研究奠定实验基础。方法采用RT-PCR技术,从分泌抗人AFP单克隆

【作者】

：

牛坚张业伟刘斌

【机构】

：

徐州医学院附属医院普外科,南京医科大学第一附属医院普外科

【出处】

：

肝胆胰外科杂志

【发表日期】

：

2011年4期

【关键词】

：

甲胎蛋白单链抗体免疫学活性 alpha fetoprotein single-chain variable fragment immunologic a

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目的构建具有免疫学活性的抗人甲胎蛋白单链抗体ScFv（single chain fragment of variety region,ScFv）,为进一步的研究奠定实验基础。方法采用RT-PCR技术,从分泌抗人AFP单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增mAb的VH、VL基因,并进一步将其组装成VH-Linker-VL型的ScFv片段。将ScFv片段亚克隆至原核分泌型表达载体pUC19,将pUC19-ScFv纯化质粒转染大肠杆菌BL21并用IPTG诱导表达ScFv蛋白。用SDS-PAGE方法检测ScFv的表达,采用

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