高效毕赤酵母表达载体的改造与应用

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构建一种可促进外源蛋白在毕赤酵母中高表达的载体,实现在同一载体中外源基因与二硫键异构酶共表达,同时失活YPS1基因。以pPICZαA载体为骨架载体,将酵母YPS1基因C端和N端非功能区序列连接至pPICZαA载体,获得重组载体pPICZαA-YPSΔ;将酵母PDI基因序列连接至pPICZαA载体,获得重组载体pPICZαA-PDI,再以重组载体pPICZαA-PDI为模板通过PCR获得PDI表达盒,然后将PDI表达盒连接至重组载体pPICZαA-YPSΔ,筛选获得高效表达载体pPICZαA-PDI-YPS
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