【摘 要】
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目的:探讨至真方通过调控M2巨噬细胞来源的外泌体逆转大肠癌细胞耐药的机制.方法:采取差异超速离心法分别提取M2巨噬细胞来源的外泌体以及100 μg/mL至真方醇提物预处理的M2
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院中医科 上海,200080;上海中医药大学附属曙光医院肿瘤科
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目的:探讨至真方通过调控M2巨噬细胞来源的外泌体逆转大肠癌细胞耐药的机制.方法:采取差异超速离心法分别提取M2巨噬细胞来源的外泌体以及100 μg/mL至真方醇提物预处理的M2型巨噬细胞来源的外泌体;用透射电子显微镜观察外泌体的形态,Western blot鉴定外泌体的标志蛋白;通过共培养体系将HCT116细胞分为3组:对照组(HCT116+PBS)、M2型巨噬细胞来源的外泌体与HCT116细胞共培养组(HCT116+M2-Exo)、至真方醇提物预处理的外泌体与HCT116细胞共培养组(HCT116+M2-Exo-ZZF),使用CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测耐药蛋白、凋亡蛋白表达.结果:M2型巨噬细胞在体外成功诱导(P＜0.01),分离并鉴定了外泌体.M2型巨噬细胞来源的外泌体与HCT116细胞共培养后,肿瘤细胞增殖率增强(P＜0.01)、凋亡率减少(P＜0.01);使用至真方醇提物预处理后,肿瘤细胞增殖率减弱(P＜0.05)、凋亡率增加(P＜0.01),并且耐药蛋白ABCB1、ABCG2的相对表达量均下调(P＜0.05),同时凋亡抑制蛋白Bcl-2表达下调(P＜0.05)、促凋亡蛋白Bax表达上调(P＜0.01).结论:至真方醇提物能够干预M2型巨噬细胞外泌体,使肿瘤细胞增殖减弱,促进肿瘤细胞凋亡并影响耐药蛋白表达从而降低结肠癌HCT116细胞对5-Fu的耐药性.
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