【摘 要】
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目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)在胎羊肝脏内的存活与分化。方法妊娠2个月时在胎羊肝脏实质区注射绿色荧光蛋白(GFP)转染标记的hUCMSC(GFP-hUCMSC),出生1月龄时取羔羊肝
【机 构】
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联勤保障部队第920医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室; 昆明医科大学920医院临床学院;
【基金项目】
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云南省重点项目(2015FA039);云南省面上项目(2017FB042);云南省后备人才项目(2018HB002)
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目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)在胎羊肝脏内的存活与分化。方法妊娠2个月时在胎羊肝脏实质区注射绿色荧光蛋白(GFP)转染标记的hUCMSC(GFP-hUCMSC),出生1月龄时取羔羊肝脏组织,制作切片后在荧光显微镜下观察GFP阳性细胞的分布,采用PCR方法检测人雄性性别决定基因(SRY)的存在; RT-PCR方法检测人肝细胞特异基因的表达;免疫组织化学染色检测人肝细胞特异蛋白的表达。注射同体积生理盐水的同月龄羔羊为对照。结果在注射了GFP-hUCMSC的1月龄羔羊肝脏组织中可观察到绿色荧光的规则或散在分布,并可检测到人SRY基因的存在。RT-PCR方法可检测到人肝细胞核因子4α(HNF4α)、肝细胞核因子3β(HNF3β)和白蛋白(ALB)基因的阳性表达;免疫组织化学染色可检测到人ALB和HNF4α蛋白的阳性表达,而对照羔羊肝脏检测不到绿色荧光阳性细胞和人SRY基因以及人肝细胞特异基因和蛋白的表达。结论 hUCMSC可以在胎羊肝脏内存活并分化为人肝细胞样细胞,并可在胎羊出生后至少持续一个月。
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