葡萄球菌肠毒素A基因原核表达系统的构建及其表达产物的鉴定

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:taomeizi2006
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目的:构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因原核表达系统,了解重组表达产物rSEA促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用。方法:采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增全长SEA基因片段,T—A克隆后测序,构建SEA基因原核表达系统pET32a—SEA-E.coliBL21DE3。采用SDS—PAGE检测rSEA表达量。Ni—NTA亲和层析法提纯rSEA。采用TCID50法测定rSEA对Vero细胞的细胞毒性并计算TCIC50值。采用MTT比色法分别检测不同浓度rSEA体外对小鼠脾细胞、人
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