检测HERG(human ether-à-go-go-related gene)钾离子通道在骨肉瘤中的表达，并探索小干扰RNA(siRNA)沉默HERG表达后对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及可能的调控机制。
方法采用反转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blotting和免疫组织化学法检测骨肉瘤MG-63细胞和组织中HERG的表达。实验分组为：HERG-siRNA处理为实验组，control-siRNA处理为对照组，未行任何处理为空白组。分别采用CCK-8法、克隆形成、流式细胞仪和Tunel法检测MG-63细胞增殖、生长和凋亡的变化。最后采用Western blo-tting检测骨肉瘤细胞中核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达水平。
结果HERG在骨肉瘤细胞和组织中异常高表达。CCK-8法结果示，实验组[(75.34±4.45)%]与对照组[(100.60±5.31)%]和空白组[(100.00±5.66)%]的细胞增殖水平相比，差异有统计学意义(t＝3.64，P＝0.007；t＝3.43，P＝0.009)。克隆形成结果示，实验组(134.30±11.82)与对照组(225.30±11.56)和空白组(232.80±12.21)的克隆形成数相比，差异有统计学意义(t＝5.51，P＝0.002；t＝5.80，P＝0.001)。流式细胞凋亡结果示，实验组[(28.10±2.21)%]与对照组[(9.36±2.42)%]和空白组[(10.92±2.51)%]的早期凋亡所占比例相比，差异有统计学意义(t＝5.72，P＝0.005；t＝5.14，P＝0.007)。Tunel法结果示，实验组[(31.57±2.08)%]与对照组[(10.35±1.82)%]和空白组[(7.96±0.88)%]的凋亡指数相比，差异有统计学意义(t＝7.69，P＝0.002；t＝10.48，P＝0.001)。抑制HERG表达可明显下调NF-κB信号通路中细胞凋亡抑制蛋白-1(cIAP-1)、X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、Bcl-2和Survivin的活性，同时还下调磷酸化NF-κB抑制蛋白(IκB)α和NF-κB p65的表达水平。
结论HERG在骨肉瘤中高表达，其通过调控NF-κB信号通路参与骨肉瘤细胞增殖和凋亡过程，有望成为骨肉瘤治疗和诊断的新靶点。