目的 研究老年大鼠主动脉与衰老相关的蛋白质,为进一步探讨衰老机制提供依据.方法 建立衰老大鼠模型,取成年(9周)和老年(12个月)Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和同龄的自发性高血压大鼠(SHR),观察血压变化情况,采用苏木伊红(HE)染色观察主动脉形态学改变,应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)多重化学标记串联质谱技术鉴定差异蛋白,同时应用实时定量聚合酶链反应(PCR)、免疫印迹(Western-blot)检测部分差异蛋白. 结果 老年组中SHR大鼠的平均收缩压比WKY大鼠高出97.1％(t=39.00,P＜0.05)；成年组中SHR大鼠的平均收缩压比WKY大鼠高出5.4％(t=3.64,P＜0.05).HE染色结果显示老年WKY组和老年SHR组大鼠主动脉出现衰老改变,且老年SHR组更明显.质谱分析鉴定了7个与衰老相关的差异蛋白,分别是前纤维蛋白1(Profilin-1)、前层蛋白A(Prelamin-A)、热休克蛋白70(HSP70)、肌酸激酶M(CK-M)、腓骨蛋白5(Fibulin-5)、真核翻译起始因子5A-1 (eIF5A)、抑制素蛋白(Prohibitin).实时定量PCR结果显示,与成年组相比,WKY与SHR老年组中Prelamin-A的mRNA表达均升高,分别为o.45±o.04与o.15±0.01、0.78±0.06与0.34±0.02(t值分别为12.67、12.06,均P＜0.01).与成年组相比,WKY与SHR老年组中Prohibitin mRNA表达降低,分别为1.34±0.05与1.01±0.06、1.24±0.05与0.88±0.08(t值分别为7.41、7.09,均P＜0.01).Western blot检测结果显示,与成年组相比,WKY与SHR老年组中Profilin-1的蛋白表达均升高,分别为9.12±0.40与20.76±0.80、16.84±0.50与55.16±0.90(t值分别为22.55、64.46,P＜0.01),且Profilin-1在SHR老年组的蛋白表达比WKY老年组的高,分别为55.16±0.90与20.76±0.80(t=49.49,P＜0.01). 结论 通过比较蛋白质组学方法鉴定老年大鼠主动脉与衰老相关的蛋白质,为血管老化的防治提供新的靶点。
衰老大鼠主动脉增龄性改变的比较蛋白质组学研究
【摘 要】
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目的 研究老年大鼠主动脉与衰老相关的蛋白质,为进一步探讨衰老机制提供依据.方法 建立衰老大鼠模型,取成年(9周)和老年(12个月)Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和同龄的自发性高血压大鼠(SHR),观察血压变化情况,采用苏木伊红(HE)染色观察主动脉形态学改变,应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)多重化学标记串联质谱技术鉴定差异蛋白,同时应用实时定量聚合酶链反应(PCR)、免疫印迹(W
【机 构】
：
250012济南,山东大学齐鲁医院老年病科山东省心血管疾病蛋白质组学重点实验室,250012济南,山东大学齐鲁医院老年病科山东省心血管疾病蛋白质组学重点实验室,250012济南,山东大学齐鲁医院老年病
【出 处】
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中华老年医学杂志
【发表日期】
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2013年32期
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