寒热不同证候大肠癌大鼠细胞外基质特征差异分析

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目的:从细胞外基质(ECM)的角度探讨寒热不同证候大肠癌发生方式不同的可能机制。方法:将70只雄性大鼠随机分为四组,正常对照组10只,寒证模型组、热证模型组各30只。采用冰水灌胃(0℃)结合冰水泡浴(10℃)和辣椒素(0.9mg/mL)加乙醇(30%)灌胃的方法建立寒热证大鼠模型。正常对照组给予等体积的生理盐水灌胃。从第6周开始在寒热证基础上采用1,2-二甲肼(DMH)溶液颈后皮下注射,25mg/kg,1次/周,连续12次诱导大肠癌模型。在造癌期间寒热证模型组分别给予冰水灌胃10mL/kg和30%乙醇溶液一直持续至第38周。组织病理学分析采苏木素-伊红(HE)、马森(Masson)和天狼星红染色对38周的结肠组织切片进行观察。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和免疫组化法对结肠组织I型胶原(COLI)、III型胶原(COLIII)、赖氨酰氧化酶相关蛋白-2(LOXL2)的表达进行检测。结果:与正常对照组比较,热证模型组和寒证模型组大鼠结肠组织中的胶原密度明显增加。与热证模型组相比,寒证模型组大鼠结肠组织胶原的密度进一步增加。对胶原纤维化相关指标进行检测结果表明,与正常对照组相比,寒、热证模型组大鼠结肠组织中COLI、COLIII和LOXL2 蛋白和mRNA表达升高(P<0.05或 P<0.01)。与热证模型组相比,寒证模型组COLI、COLIII、LOXL2 蛋白和mRNA表达更高(P<0.05或 P <0.01)。结论:寒、热证不同宿体大肠癌发生发展的方式不同可能与胶原纤维化程度的差异有关。
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