利用报告基因rNIS监测大鼠骨髓间充质干细胞移植大鼠心肌的可行性研究

来源 :中华核医学与分子影像杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:axiaaawei
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目的 研究大鼠钠碘转运体(rNIS)作为报告基因监测大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSC)移植至大鼠心肌的可行性.方法构建含rNIS/增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组腺病毒载体(Ad/rNIS/EGFP),转染rBMSC后应用荧光显微镜观察细胞表达EGFP情况.按随机数字表法将健康大鼠分为3组,rNIS组大鼠心肌内移植转染rNIS的rBMSC;抑制组大鼠心肌内移植转染rNIS的rBMSC,γ显像前口服高氯酸纳;对照组大鼠心肌内移植未转染病毒的rBMSC.细胞移植到大鼠心肌后,以99TcmO4-作为报告探针对大鼠进行γ显像,随后进行生物学分布实验,用实时聚合酶链反应(PCR)和Westernblot分别检测心肌组织中rNIS基因和蛋白表达水平,免疫组织化学检测心肌组织中CD11b、CD29、CD34、CD44、CD45和CD90表达情况.组间计量资料的差异用t检验分析.结果重组腺病毒转染后,荧光显微镜下可见到高表达EGFP的rBMSC.rNIS转染的rBMSC移植到大鼠心肌后,γ显像能清晰显示移植部位的心肌,心肌/右前肢放射性比值(RUR)为6.7±0.4,对照组RUR为3.0±0.2,二者之间比较差异有统计学意义,t=2.78,P=0.03.生物学分布实验中,对照组心肌组织的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)为2.5±0.4,明显低于rNIS组的60.2±20.8,差异有统计学意义,t=7.13,P<0.001.移植心肌组织中rNIS的基因和蛋白都高表达,而对照组心肌组织rNIS表达较低.移植转染细胞的心肌组织中,CD29、CD44、CD90表达阳性,CD11b表达弱阳性,CD34、CD45表达阴性.结论rNIS可作为报告基因有效监测rBMSC移植大鼠心肌。

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