【摘 要】
：
目的 建立OmpA过表达慢病毒载体并观察其对RAW264.7细胞NLRP3炎症小体的激活. 方法 以鲍曼不动杆菌ATCC 19606为模板,设计引物扩增OmpA基因,将其克隆至慢病毒表达载体pCDH-MS
【机 构】
：
首都医科大学附属北京朝阳医院医学研究中心,北京,100020;中国医学科学院北京协和医院检验科
论文部分内容阅读
目的 建立OmpA过表达慢病毒载体并观察其对RAW264.7细胞NLRP3炎症小体的激活. 方法 以鲍曼不动杆菌ATCC 19606为模板,设计引物扩增OmpA基因,将其克隆至慢病毒表达载体pCDH-MSCV-copGFP中.将此表达质粒和辅助质粒共转染HEK293T细胞包装病毒,浓缩病毒上清液并用GFP报告基因法测定病毒滴度;用包装病毒颗粒感染RAW264.7细胞48 h,Real-time PCR法检测OmpA的mRNA表达水平,用Western blot法检测OmpA蛋白以及感染后NLRP3炎症小体相关蛋白. 结果 成功构建OmpA过表达慢病毒载体并在HEK293T细胞中包装得到病毒,经测定病毒滴毒为1.5×109TU/mL;重组OmpA病毒感染RAW264.7细胞表达OmpA蛋白,该蛋白能引起NLRP3炎症小体激活. 结论 成功构建OmpA过表达慢病毒载体并证明OmpA可激活RAW264.7细胞NLRP3炎症小体.
其他文献
目的 调查分析福建地区健康人携带德尔卑沙门菌的耐药特征及遗传多样性. 方法 分离自福建地区健康人的德尔卑沙门菌73株,采用K-B法进行药敏试验;采用PBRT法检测18个主要质粒
本文提出了沉桩阻力的估算公式,利用双桥静力触探资料模拟了压桩力曲线和计算终压力.对压桩力的连续计算编制了程序,可以对比显示计算和实测曲线,其结果令人满意,对采用静力
本文介绍了苏通大桥连续刚构主梁静气动力系数确定、风场模拟、气弹模型设计、气弹模型风洞试验和风载刎内力计算等内容.试验结果表明,模型动力特性模拟误差很小;在紊流场和
目的 调查452例妊娠晚期孕妇B族链球菌感染情况及妊娠结局,并对孕妇B族链球菌定植高危因素进行分析. 方法 选择2017年1月～2019年10月在本院顺利分娩的妊娠晚期孕妇452例,筛查
沙眼衣原体是一种严格细胞内寄生的病原体,也是最常见的性传播疾病病原体,可感染人类多个系统引起多种疾病而影响人类健康.沙眼衣原体具有独特的发育周期,黏附和入侵宿主细胞
目的 研究大肠埃希菌全基因组中规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPRs)的间隔序列分布及来源规律.方法 通过BLAST、CRISPRs finder、ClustalX和CRISPRTarget分析CRISPR/Cas
目的 制备耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)抗原的卵黄抗体IgY,建立检测MRSA的酶联寡聚核苷酸吸附试验(ELONA)方法 . 方法 用大肠埃希菌原核表达并纯
目的 对弓形虫微线蛋白25 (TgMIC25)进行生物信息学分析,并预测其互作蛋白. 方法 利用ExPASY在线软件对TgMIC25蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构域、结构域、二/三级蛋白结
沥青路面具有表面平整、行车舒适、噪音低、施工期短、养护维修简便,且适宜于分期修建等优点,因此在高等级公路中得到广泛应用.本文结合青银高速公路沥青路面的施工情况,对高
我国是世界上黄土分布最广泛的地区,分布连续,最厚,最完整,最具有代表性.黄土由于具有特殊的结构而具有特殊的工程性质,具有湿陷性和较低的承载力,极易产生各种各样的工程质