【摘 要】
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本研究旨在构建SIRT6基因的RNA干扰慢病毒载体,并在水牛成纤维细胞中验证载体的有效性。设计合成2条特异性水牛SIRT6基因的shRNA序列,分别将其克隆至Psi-LVRU6GP慢病毒干扰载
【机 构】
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广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31760334、31860644),广西自然科学基金(AA17204051、2018GXNSFAA281007),南宁市科学研究与技术开发计划(20192087)
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本研究旨在构建SIRT6基因的RNA干扰慢病毒载体,并在水牛成纤维细胞中验证载体的有效性。设计合成2条特异性水牛SIRT6基因的shRNA序列,分别将其克隆至Psi-LVRU6GP慢病毒干扰载体上,重组质粒通过琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定。将重组质粒与慢病毒包装载体NRF、VSVG共转染293T细胞,荧光显微镜下检查转染效果。转染60 h后收集病毒悬液,并感染水牛胎儿成纤维细胞(BFF),qRT-PCR检测干扰效果。结果显示:成功构建了2个RNA干扰SIRT6基因表达的慢病毒重组质粒;经慢病毒包装感染水牛成纤
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