小鼠pLCK—CD69-IRES—EGFP表达载体构建及CD69转基因小鼠的建立

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目的:构建携小鼠细胞表面活化蛋白CD69和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)在细胞内核糖体切入位点(IRES)的表达载体pLCK—CD69-IRES—EGFP,并基于此创建CD69转基因小鼠。方法:首先通过小鼠肺组织提取RNA,逆转录成为cDNA,经过PubMed搜索设计PCR引物,PCR法扩增mCD69片断,接着将该DNA片段经测序验证后接入pInsulater—LCK—IRES—EGFP质粒,构建pLCK—CD69-IRES—EGFP转基因载体;再将其转染到293T细胞中,通过荧光显微镜技术确定其在293
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