桂花OfF3’H基因的克隆与表达分析

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类黄酮3’-羟化酶(F3’H)属于细胞色素P450单加氧酶家族,是苯丙烷类代谢途径关键成员,在植物色泽形成及类黄酮成分调控方面起重要作用.本研究以四季桂‘金玉台阁’为实验材料,采用cDNA末端快速扩增法(RACE)从盛花末期小花cDNA中克隆了桂花OfF3’H基因(GenBank编号:MH509392).序列分析结果显示该基因全长为1 856 bp,其中5’端非翻译区长度为102 bp,3’端非翻译区长度为191 bp,开放阅读框长度为1563 bp,编码由520个氨基酸残基组成的蛋白质.系统进化分析表明OfF3’H含有植物F3’H蛋白典型的保守结构域,且与猕猴桃的AcFYH蛋白亲缘关系最近.桂花花期不同阶段生理与分子研究发现初花期OfF3’H基因表达量和总黄酮含量均为最低,而花谢期OfF3’H基因表达量和总黄酮含量达到最高.此外,OfF3’H存在10个潜在的磷酸化位点,其中第83位点的丝氨酸和第304位点的苏氨酸在不同植物间高度保守.本研究为深入研究桂花花色形成及植物类黄酮合成调控的分子机制提供一定的理论依据.
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