问号钩端螺旋体赖株基因组中一个新溶血基因的表达及功能鉴定

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kaokao514

【摘要】

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目的对问号钩端螺旋体赖株基因组中LA0202基因进行克隆表达并对重组蛋白的溶血活性进行初步鉴定。方法以问号钩端螺旋体赖株基因组DNA为模板。PCR扩增LA0202基因并重组到原核

【作者】

：

杨杨秦金红杨宏亮钟怡何平胡宝瑜郭晓奎

【机构】

：

上海交通大学医学院病原生物学教研室

【出处】

：

中国人兽共患病学报

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

问号钩端螺旋体溶血活性溶血素基因蛋白表达 Leptospira interrogansl hemolytic activity hemolysin gen

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30670102,30370071）

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目的对问号钩端螺旋体赖株基因组中LA0202基因进行克隆表达并对重组蛋白的溶血活性进行初步鉴定。方法以问号钩端螺旋体赖株基因组DNA为模板。PCR扩增LA0202基因并重组到原核表达载体pET28b（＋）。重组质粒经限制性核酸内切酶酶切并经测序鉴定后。在大肠埃希菌BL21中诱导表达重组蛋白。制备绵羊血平板对表达的重组蛋白进行溶血活性鉴定。RT-PCR检测钩端螺旋体赖株体外培养时LA0202基因的转录。结果在大肠埃希菌中成功表达LA0202基因。表达的重组蛋白具有溶血活性。RT-PCR结果显示钩端螺旋体赖株

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