重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL一12)的构建和真核表达

来源 :西安医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oversky99
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的克隆人IL-12(hIL-12)p40和p35亚单位cDNA,构建人单链IL-12(rhscIL-12)融合基因,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法从经PDBu刺激的EBV转化的人B淋巴母细胞株NC37中提取mRNA,经RT-PCR分别获得hIL-12p40和p35亚单位编码序列的cDNA,运用重组PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头(Gly4Ser)3 DNA序列进行体外基因重组,构建rhscIL-12融合基因,将其插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,经脂质体转染COS7细胞进行表达,Western b1ot进行分析。结果所克隆的hIL-12p40、p35cDNA序列和构建的rhscIL-12融合基因DNA序列均经测序得以证实,融合基因可在COS7中表达其产物rhscIL-12融合蛋白,其分子量为70KD,可与鼠抗人IL-12p40/p70单克隆抗体特异性结合。结论本研究结果为进一步探讨rhscIL-12融合蛋白的生物学活性和特性奠定了基础,也为rhscIL-12融合基因在原核细胞中的表达提供了可能性。
其他文献
为建立嗜麦芽假单胞菌hCG受体酶联测定法,先将L-赖氨酸加入酶标板中温育,再加入戊二醛以产生多聚赖氨酸,通过多聚赖氨酸将完整细菌吸附于酶标板上,并以此为基础进行酶联受体
目的探讨同种异体睾丸移植中吻合输精管动脉的临床意义.方法取去势手术病人睾丸10只,在10倍手术显微镜下,经输精管动脉灌注碳素墨水,直接显示输精管动脉的支配区域.结果输精
本文报告采用髓鞘碱性蛋白(MBP)的修饰性肽段配体(APL)对多发性硬化症(MS)患者治疗1年后,在细胞克隆水平分析T细胞免疫应答的结果.从5例患者外周血淋巴细胞中建立了31个APL特
目的通过对脑弥漫性轴索损伤(DAI)临床、CT及MRI的影像学表现的分析,以期提高对DAI的诊断水平.方法分析有完整临床资料,同时进行过CT和MRI检查,特别是CT检查相对阴性的32例DA
目的:探寻一种对脊柱稳定性影响较小的选择性脊神经后根切断术治疗脑瘫肢体痉挛.方法:采用双侧连续开窗式行双侧L1~S1 5个节段的椎板间开窗,将L2~S1神经根后根分开、分束,将阈
目的探讨降低肝内胆管结石再次手术的方法.方法对301例肝胆管结石再手术病例的临床资料进行回顾性分析.结果本组有295例(98%)肝胆管结石病人,因多种原因致结石残留或复发,导
目的寻找手部大范围多元组织毁损后组织修复及功能重建的最佳方法.方法 1990年1月~1999年6月,采用急症(33例)、亚急症(伤后三天内,26例)吻合血管的组织移植或复合组织移植的方
目的:通过测定酸处理液中离子的溶出量,进一步认识有关玻璃离子水门汀的固化化学和固化后玻璃离子水门汀的结构;探讨用酸预处理玻璃微粉以改善玻璃离子水门汀固化性能的机制.
目的提出颅内脑膜瘤的分级方案以判断预后.方法通过对210例颅内脑膜瘤的统计分析,选择肿瘤大小、供血情况及肿瘤部位3项指标进行评分分级.结果级别越高,全切除率越低,而死亡
目的:研究内皮素(ET)受体基因亚型在心功能不全心肌中的表达,并探讨它和心功能分级及心肌肥大的关系.方法:选取40例行瓣膜置换术的心功能不全病人心肌500mg,同时取10例健康心