基于T7 RNA聚合酶的传染性法氏囊病病毒反向遗传系统的建立

来源 :浙江大学学报:农业与生命科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:KurtJohns
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为了建立传染性法氏囊病病毒反向遗传系统,应用PCR法在鸡传染性法氏囊病病毒基因组A、B两节段的5’末端和3’末端分别引入T7启动子和核酶HDV序列,然后分别将含有T7启动子和核酶HDV序列的A、B节段构建到载体PT—Pluc当中,构建感染性载体PTmA和PT—mB.在脂质体介导下将PT—mA和PT—mB共转染经痘病毒vTF7—3(含T7RNA聚合酶基因,能稳定表达T7RNA聚合酶)预先感染1h的vero细胞.细胞病变观测、间接免疫荧光试验、电镜观察和分子标记检测证实成功实现了鸡传染性法氏囊病病毒的遗传拯救
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