猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆与表达及间接ELISA方法的建立

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针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a-SBC.阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下表达大小约38 kD的蛋白,重组蛋白以包涵体的形式存在.Western blot分析表明,表达产物具有良好的免疫学活性.以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测TGEV抗体的间接ELISA (TGEV SBC-ELISA)方法.表
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