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以乙酰胺为内标物，丙烯酰胺在10～70g／L范围内，丙烯酰胺／乙酰胺的质量比与其积分峰面积比呈线性关系，相对标准偏差为0．079％；pH值影响酶活性测定结果的准确性，pH值低于2．0时，酶反应终止，pH值越低，丙烯酰胺凝聚为聚丙烯酰胺的量越大，200肛L5．0mol／L的盐酸是适宜量；根据谱图中丙烯腈是否出峰，决定反应体系中发酵液的加入量，酶活性较高时，采用0．5mL的发酵液加入量。