肿瘤坏死因子诱导的U937细胞凋亡与Bcl-2基因表达的关系

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目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)诱导的U937细胞凋亡与Bcl2基因表达的关系。方法首先用TNF处理U937细胞,提取小片段DNA进行DNA断裂分析,并通过RTPCR检测细胞的Bcl2基因mRNA表达;继而以磷酸钙沉淀法将Bcl2基因转染到U937细胞,用G418筛选稳定转染子,然后用不同剂量TNF处理后观察转染与未转染细胞的存活率。结果TNF诱导的U937细胞Bcl2基因的mRNA表达下调;用Bcl2稳定转染的U937细胞经TNF处理,存活率明显高于未转染细胞。结论Bcl2基因增强表达阻抑TNF诱导的U937细胞凋亡。 Objective To investigate the relationship between apoptosis of U937 cells induced by tumor necrosis factor (TNF) and the expression of Bcl2 gene. Methods U937 cells were first treated with TNF to extract small fragments of DNA for DNA fragmentation analysis. RT-PCR was used to detect the expression of Bcl2 mRNA in the cells. Then, Bcl2 gene was transfected into U937 cells by calcium phosphate precipitation method. Stable transfectants were screened with G418, and the viability of transfected and non-transfected cells was observed after treatment with different doses of TNF. Results The expression of mRNA in Bcl2 gene was down-regulated in TNF-induced U937 cells. The survival rate of U937 cells stably transfected with Bcl2 was significantly higher than that of untransfected U937 cells. Conclusion Bcl2 enhances the expression of Bcl2 gene and inhibits the apoptosis of U937 cells induced by TNF.
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