灯盏细辛对大鼠肾冷缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

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目的 观察中药灯盏细辛对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤(IRI)中肾脏细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法 封闭群SD大鼠36只,随机分为3组,每组12只.假手术组(A组),对照组(B组),实验组(C组).药物应用:C组术前15 min,灯盏细辛注射液按1.2 ml/100 g通过尾静脉注射,A、B组按相应剂量注射生理盐水.动物手术:A组,切除右肾.B、C组采用的是冷IRI模型,3组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾进行检测.透射电镜检查肾组织形态学,免疫组织化学检测凋亡相关的基因bcl-2与bax的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果 (1)超微结构检查(透射电镜):A组结构正常;B组细胞呈损伤形态:线粒体肿胀,微绒毛减少,胞质内空泡形成,部分细胞核可见凋亡迹象.C组病变较B组显著减轻.(2)免疫组织化学蛋白阳性染色指数(PI):缺血再灌注后B、C组的bcl-2表达分别为(21.21±1.18)%和(35.52±1.94)%,较A组(4.95±0.77)%均增多(P<0.05),B组低于C组(P<0.05).B、C组的bax表达分别为(58.55±2.90)%和(45.90±3.14)%,较A组(4.67±0.67)%增多(P<0.05),而且B组高于C组(P<0.05).A组的蛋白阳性染色指数的比值bcl-2/bax为(1.06±0.07)高于B组(0.35±0.03)和C组(0.78±0.07,P<0.05),而且C组高于B组(P<0.05).(3)细胞凋亡检测(TUNEL):细胞凋亡指数B组(28.57±3.58)%和C组(19.99±3.37)%均显著大于A组(2.33±0.42)%(P<0.01),C 组小于B组(P<0.01).结论 灯盏细辛减少大鼠肾脏冷IRI诱导的肾脏细胞的凋亡,与调节凋亡相关基因bcl-2与bax表达有关.
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