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禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)为单股负链RNA，是正粘病毒科流感病毒属成员，由8个独立的RNA节段组成，显著的生物学特征之一是亚型众多，变异频繁.目前对AIV进行快速检测的方法有IFA、ELISA、RT-PCR、Real-time RT-PCR、NASBA(Nucleic acid sequence-based amplification)和Microarray等，其中RT-PCR技术是研究的热点之一.而一步法RT-PCR在此基础上更进一步，是指在一个反应体系中同时设立2对或2对以上引物，用于扩增不同的目的片段.目前这种方法可以同时检测流感病毒的型和亚型，Poddar SK用一步法多元-PCR检测和用已经建立好的单抗-ELISA方法检测，结果表明两种方法之间有很好的吻合率.Choi YK[19]设计两个多元PCR，一个用来鉴别H1和H3，另一个鉴别N1和N2，结果表明多元PCR方法可以同时鉴别流感病毒亚型.本研究针对我国家禽中流行较为广泛的H5亚型AIV的HA基因建立了一种一步法RT-PCR诊断方法，该方法具有样品量少、特异性强、敏感性高、耗时短等特点.该方法的建立和应用为鸟类的分子流行病学调查和对禽流感暴发初期的尽早诊断提供了有利武器。