目的 探讨非经典性NF-κB信号通路在慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)中的作用.方法 采用实时荧光定量RT-PCR法检测56例B-CLL初诊患者骨髓CD5+CD19+细胞(CLL-B细胞)NF-κB家族成员mRNA表达水平;采用TransAMTMELISA法定量分析CLL-B细胞核中NF-κB蛋白质复合物的活性成分;采用流式细胞术分析CLL-B细胞体外单独或与骨髓基质细胞(hBMSC)共培养后细胞死亡率;采用Western blot法检测共培养对骨髓CLL-B细胞中NF-κB家族成员RelA和RelB蛋白水平表达的影响.结果 CLL-B细胞的NF-κB家族成员RelA、p50、RelB和p52 mRNA水平均高于正常B细胞,差异有统计学意义(P值均<0.01).所有标本中CLL-B细胞都存在RelA活化,而RelB只在部分标本中活性增强.CLL-B细胞核中平均RelA活性比正常B细胞显著增强,而平均RelB活性与正常B细胞相似.体外单独培养24、48和72 h时,RelA +/RelB-组CLL-B细胞死亡率分别为(35.54±4.43)%、(50.92±8.44)%和(49.24±8.16)%;RelA+/RelB+组CLL-B细胞死亡率分别为(20.65±2.37)%、(18.17±1.36)%和(26.55±4.08)%.与hBMSC共培养,RelA+/RelB-组CLL-B细胞死亡率较单独培养时下降,但相对于RelA+/RelB+组CLL-B细胞死亡率仍较高;共培养48 h后,RelA+/RelB-组CLL-B细胞中RelA和RelB显著上调,RelA+/RelB+组中CLL-B细胞质中RelA表达上调,RelB在胞质中显著下调并在胞核中轻度上调.结论 骨髓CLL-B细胞中存在非经典性NF-κB的活化,RelB活化程度在不同的CLL-B细胞中差异显著;RelB和RelA活化共表达赋予骨髓CLL-B细胞存活优势,CLL-B细胞与hBMSC共培养,通过诱导CLL-B细胞中RelA和RelB的表达发挥对其体外存活的保护作用。
非经典性NF-κB活性在慢性B淋巴细胞白血病中的作用
【摘 要】
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目的 探讨非经典性NF-κB信号通路在慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)中的作用.方法 采用实时荧光定量RT-PCR法检测56例B-CLL初诊患者骨髓CD5+CD19+细胞(CLL-B细胞)NF-κB家族成员mRNA表达水平;采用TransAMTMELISA法定量分析CLL-B细胞核中NF-κB蛋白质复合物的活性成分;采用流式细胞术分析CLL-B细胞体外单独或与骨髓基质细胞(hBMSC)共培养后细
【机 构】
:
215006苏州大学附属第一医院中心实验室,215006苏州大学附属第一医院中心实验室,215006苏州大学附属第一医院中心实验室
【出 处】
:
中华血液学杂志
【发表日期】
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2014年35期
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