化学修饰法制备B组轮状病毒生物素核酸探针及应用研究

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用亚硫酸氢钠-乙二胺溶液对B组轮状病毒的ssRNA胞嘧啶修饰和转氨基作用,与生物素e-氨基己酸N-羟基琥珀酰亚胺酯反应,制备探针与样品在硝酸纤维膜上的进行点杂交,经亲合素-碱性磷酸酶系统显色,可测出106.25-212.5pg的RNA靶序列,特异性试验表明,B组生物素探针只能与B组核酸杂交;而与无关核酸无杂交信号,用B组探针检测45份仔猪腹泻粪样,检出B组阳性5份,检出率11.1%,明显高于PAG
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