人Hes1-shRNA,Hes5-shRNA慢病毒表达载体的构建、包装及鉴定

来源 :医学分子生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tingyu263

【摘要】

：

目的构建人Hesl-shRNA和Hes5-shRNA慢病毒表达载体，为Notch—Hes信号通路的相关研究奠定基础。方法根据人Hes1，Hes5基因mRNA序列分别设计、合成多对互补的DNA单链寡核苷酸，退火

【作者】

：

王春华林玲郑志竑

【机构】

：

福建医科大学分子医学研究中心,福建医科大学附属协和医院神经外科

【出处】

：

医学分子生物学杂志

【发表日期】

：

2010年1期

【关键词】

：

Notch信号通路 Hes1基因 Hes5基因慢病毒 Notch signal pathway Hes1 gene Hes5 gene RNAi lentiv

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目的构建人Hesl-shRNA和Hes5-shRNA慢病毒表达载体，为Notch—Hes信号通路的相关研究奠定基础。方法根据人Hes1，Hes5基因mRNA序列分别设计、合成多对互补的DNA单链寡核苷酸，退火后克隆至pENTR／U6入门载体。通过入门载体瞬时转染神经胶质瘤U251细胞筛选有效干扰序列。将含有效干扰序列的入门载体与pLenti6／BLOCK—iT—DEST载体进行LR重组构建Hesl—shRNA和Hes5-shRNA慢病毒表达载体，经脂质体介导入293FT细胞，包装成慢病毒。用该慢病毒感染U

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