【摘 要】
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该研究以LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型为载体,观察萸连汤抗炎活性“制剂质量标志物”的体外抗炎作用。以LPS刺激Raw264.7细胞制备体外炎症模型,随机分为对照组,LPS组(50 ng·mL-1 ), 萸连汤中18种化合物分低(0.1 μmol·L-1+LPS 50 ng·mL-1 ),中(1 μmol·L-1+LPS 50 ng·mL-1 ),高(10 μmol·L-1 +LPS 50
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ZZ13-YQ-052,ZZ2019008,ZZ14-YQ-041,L2019010); 国家非物质文化遗产项目中医传统制剂方法(Ⅸ-4(1)); 中国中医科学院创新工程项目(CI2021A04803;CI2021A04313); 国家自然科学基
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该研究以LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型为载体,观察萸连汤抗炎活性“制剂质量标志物”的体外抗炎作用。以LPS刺激Raw264.7细胞制备体外炎症模型,随机分为对照组,LPS组(50 ng·mL-1 ), 萸连汤中18种化合物分低(0.1 μmol·L-1+LPS 50 ng·mL-1 ),中(1 μmol·L-1+LPS 50 ng·mL-1 ),高(10 μmol·L-1 +LPS 50 ng·mL-1 )剂量组,CCK8法检测萸连汤中18种化合物干预Raw264.7细胞24h的活力;ELISA法检测Raw264.7细胞上清中炎症因子TNF-α和IL-6的含量。结果显示,随着浓度的升高对TNF-α抑制率升高的化合物有小檗碱、黄连碱、木兰花碱、表小檗碱、非洲防己碱、木香烃内酯;随着浓度的升高对TNF-α抑制率降低的化合物有柠檬苦素、去氢吴茱萸碱、绿原酸、新绿原酸、格兰地新碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、黄柏碱;浓度变化对TNF-α抑制率影响不大的化合物有巴马汀、药根碱、去氢木香烃内酯及隐绿原酸。随着浓度的升高对IL-6抑制率升高的化合物有去氢吴茱萸次碱、绿原酸、新绿原酸、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、木香烃内酯、黄柏碱、隐绿原酸;随浓度变化对IL-6抑制率基本不变的有小檗碱、黄连碱、木兰花碱、表小檗碱、柠檬苦素、非洲防己碱、格兰地新碱、去氢木香烃内酯;对IL-6抑制率出现最大浓度的化合物有巴马汀、药根碱。结合萸连汤的定性、定量“制剂质量标志物”及量效实验结果,确定其抗炎活性“制剂质量标志物”15种,分别为:小檗碱、黄连碱、巴马汀、木兰花碱、表小檗碱、柠檬苦素、非洲防己碱、药根碱、新绿原酸、绿原酸、格兰地新碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、去氢木香烃内酯、木香烃内酯。综上所述,研究提供了一种快速筛选萸连汤的抗炎活性“制剂质量标志物”的策略,为萸连汤另外3种活性“制剂质量标志物”的确定明确了路径。
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