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介绍了用HPLC法对醋酸泼尼松发酵液中的底物醋酸可的松和产物醋酸泼尼松的含量进行测定的方法。采用正相硅胶吸附色谱柱，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（体积比86．0：12．0：1．6：0．4）为流动相，在240nm波长下检测，流速0．8ml／min。发现两种组分分离良好，醋酸可的松和醋酸泼尼松的线性范围均为40～600μg／ml；检出限均为0．1μg／ml。该方法准确，灵敏，重现性好。