PCR扩增肺癌组织puma基因第四外显子的实验研究

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目的探讨PCR扩增肺癌组织中puma基因第四外显子(GC含量76.44%)的最适实验条件.方法通过改变PCR反应体系各组分的浓度和反应条件,探讨PCR反应体系最适浓度和反应条件.结果PCR反应体系为dNTP200μmol/L,普通MgCl2 1.0mmol/L,引物500nmol/L,TaqDNA聚合酶0.1U/μL,模板量不低于4000ng,普通10×扩增体系缓冲液5μL,总体积50μL.反应条件为94℃预变性5min,94℃ 45s、61℃ 45s、72℃ 45s循环33次,最后72℃延伸5
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