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【摘 要】以牡丹皮为原料，以水蒸气蒸馏法为提取方法，以加水量、提取时间、提取次数为考察因素，设计单因素试验和正交试验；Na2SO4和NaCl为辅助提取试剂，分别设置六个梯度；并辅以超声提取法，以超声功率、时间、温度为考察因素，设计单因素试验和正交试验。以丹皮酚提取量为指标，确定丹皮酚的最佳提取工藝条件。实验结果显示丹皮酚的最佳提取工艺为Na2SO4加入量为药材量的3%，超声功率80W，超声时间10min，超声温度30°的辅助条件下，加12倍水，提取时间3h，提取1次。
【关键词】正交试验法；丹皮酚；优化；提取工艺
The optimization extraction process of Danphenol by orthogonal test from cortex moutan radicis
Juanhua-Li Ren-Li
（Shaanxi institute of international trade & commerce，Shaanxi Xianyang，712046）
Abstract：This paper use steam distillation from cortex moutan radicis to get Danphenol.The steam distillation extraction method design orthogonal experiment according to water addition，extraction time，extraction times as factors and Na2SO4 and NaCl as auxiliary extraction reagent；the ultrasonic-assisted extraction design orthogonal experiment according to ultrasonic power，time，temperature to examine factors.According to extract quantity as an index，were to determine the best extraction technology.Experimental results show that the best extraction technology were Na2SO4 addition amount for 3% of the amount of medicine，ultrasound power 80 w，10 min，ultrasonic time of ultrasonic temperature 30°auxiliary conditions，with 12 times more water，the extracting time 3 h，extracted one time.
Keywords：orthogonal experiment design；Danphenol；optimization；extraction process
前言
牡丹作为毛茛科植物，它的根皮是中医临床常用的中药之一。虽然牡丹根皮的药用记载有将近千年历史，但直到20世纪50年代以来才有学者对它的药用成分进行分析研究。由于丹皮酚可以抑制细胞内的O自由基产生，因此能使皮肤变白，将皮肤中常年沉积的色素还原退化，具有保护血管、血液循环[1-3]、抗心律失常[4]、抗氧化[5]、消除瘀斑、消炎、消肿止痛[6-8]、抗过敏、抗病毒等作用，有较好的治疗和保健效果。此外，还在牙膏、牙粉、漱口液、压痛水中有较好的作用。本实验以水蒸气蒸馏法为基础，通过对实验试剂、提取因素、超声辅助提取因素进行正交试验，优化提取工艺。
1 实验材料
1.1 实验材料
中药饮片：牡丹皮（陕西康盛堂药业有限公司）
试剂：水；Na2SO4、NaCl（均购自天津市红岩化学试剂厂）
1.2 实验仪器
2 试验方法
2.1水蒸气蒸馏法条件优化实验
提取方法：本实验采用水蒸气蒸馏法，取牡丹皮50g，捣碎并置于1000ml圆底烧瓶加水浸泡12h，连接好提取装置，选用恒温电热套进行加热提取，收集提取液静置12h，抽滤，置于室温晾干，称重。
2.2 加盐种类及浓度实验
提取方法：本实验采用水蒸气蒸馏法，取牡丹皮50g，捣碎并置于1000ml圆底烧瓶加一定浓度盐溶液浸泡12h，连接好提取装置，选用恒温电热套进行加热提取，收集提取液静止12h，抽滤，置于室温晾干，称重。
（1）Nacl浓度依次为：1%；2%；3%；4%；5%；6%
（2）Na2SO4浓度依次为：1%；2%；3%；4%；5%；6%
2.3超声辅助提取条件的实验
提取方法：本实验采用水蒸气蒸馏法，取牡丹皮50g，捣碎并置于1000ml圆底烧瓶加水浸泡12h，置于不同条件下的超声波清洗器进行清洗后，连接好提取装置，选用恒温电热套进行加热提取，收集提取液静止12h，抽滤，置于室温晾干，称重。
3 结果与分析
3.1 优化水蒸气蒸馏法条件实验结果
由表4可知，影响提取效果的顺序依次为B（提取时间）>C（提取次数）>A（加水量），根据各因素对应的K1，K2，和K3（各取最大值）推断得理论最佳提取工艺为A1B3C1，即提取时间3h，提取次数1次，加水量12倍。
3.2加盐种类及浓度实验结果分析
由图1可知，丹皮酚的量随着Nacl的增加，1%到4%时丹皮酚的量都不变，5%时丹皮酚含量最高，而后不变。 （2）加入Na2SO4
由图2可知，丹皮酚的量随着Na2SO4含量增加先增大后减小，当Na2SO4含量为3%时丹皮酚的量最大，而后开始减少。
3.3 超声辅助提取条件实验结果分析
由直观分析表可知，影响提取效果的顺序依次为C（超声功率）>A（超声时间）>B（超声温度），根据各因素对应的K1，K2，和K3（各取最大值）推断得理论最佳提取工艺为C1A1B2，即超声功率80W，时间10min，温度30°最佳。
4 结论
本论文在单因素试验的基础上开展正交试验，通过实验测定，丹皮酚的最佳提取工艺为Na2SO4加入量为药材量的3%，超声功率80W，超声时间10min，超声温度30°的辅助条件下，加12倍水，提取时间3h，提取1次。与其他实验研究者研究结论相比较，虽然有一定的提高，但提高效果并不明显。
参考文献：
[1] 钟继昌，戴敏，潘礼龙.丹皮酚对ox-LDL誘导的大鼠血管内皮细胞黏附功能的抑制作用[J].安徽中医学院学报，2007，26（6）：31-34.
[2] 杨骅，马继琴，韩志云，等.丹皮酚对急性微循环障碍大鼠血管内皮细胞分泌的ET-1和NO的调控[J].海峡药学，2008，20（6）：47-49.
[3] 戴敏，刘青云，訾晓梅.丹皮酚对高脂血症大鼠动脉内皮细胞的保护作用[J].中国中医基础医学杂志，2001，7（2）：38-40.
[4] 王腾，唐其柱，江洪，等.丹皮酚对豚鼠心肌细胞动作电位及钙通道电流的影响[J].武汉大学学报：医学版，2001，22（4）：331-333.
[5] 吴晓慧，吴国荣，张卫明，等.丹皮酚及其磺化物体外抗氧化作用[J].南京师范大学学报：自然科学版，2005，28（3）：83-85.
[6] 刘春云，武延章，周大喜.凤丹丹皮酚抗菌作用的研究[J].生物学杂志，2000，17（3）：23-24.
[7] 杜凡，李惠芬，王宇歆，等.牡丹皮中丹皮酚、总苷、多糖单用及合用后的协同抑菌作用考查[J].天津药学，2008，20（2）：10-12.
[8] 武海军，徐继辉，李月玲，等.丹皮酚的抗炎作用研究[J].包头医学院学报，2008，24（3）：238-239.
（作者单位：陕西国际商贸学院）
【关键词】正交试验法；丹皮酚；优化；提取工艺
The optimization extraction process of Danphenol by orthogonal test from cortex moutan radicis
Juanhua-Li Ren-Li
（Shaanxi institute of international trade & commerce，Shaanxi Xianyang，712046）
Abstract：This paper use steam distillation from cortex moutan radicis to get Danphenol.The steam distillation extraction method design orthogonal experiment according to water addition，extraction time，extraction times as factors and Na2SO4 and NaCl as auxiliary extraction reagent；the ultrasonic-assisted extraction design orthogonal experiment according to ultrasonic power，time，temperature to examine factors.According to extract quantity as an index，were to determine the best extraction technology.Experimental results show that the best extraction technology were Na2SO4 addition amount for 3% of the amount of medicine，ultrasound power 80 w，10 min，ultrasonic time of ultrasonic temperature 30°auxiliary conditions，with 12 times more water，the extracting time 3 h，extracted one time.
Keywords：orthogonal experiment design；Danphenol；optimization；extraction process
前言
牡丹作为毛茛科植物，它的根皮是中医临床常用的中药之一。虽然牡丹根皮的药用记载有将近千年历史，但直到20世纪50年代以来才有学者对它的药用成分进行分析研究。由于丹皮酚可以抑制细胞内的O自由基产生，因此能使皮肤变白，将皮肤中常年沉积的色素还原退化，具有保护血管、血液循环[1-3]、抗心律失常[4]、抗氧化[5]、消除瘀斑、消炎、消肿止痛[6-8]、抗过敏、抗病毒等作用，有较好的治疗和保健效果。此外，还在牙膏、牙粉、漱口液、压痛水中有较好的作用。本实验以水蒸气蒸馏法为基础，通过对实验试剂、提取因素、超声辅助提取因素进行正交试验，优化提取工艺。
1 实验材料
1.1 实验材料
中药饮片：牡丹皮（陕西康盛堂药业有限公司）
试剂：水；Na2SO4、NaCl（均购自天津市红岩化学试剂厂）
1.2 实验仪器
2 试验方法
2.1水蒸气蒸馏法条件优化实验
提取方法：本实验采用水蒸气蒸馏法，取牡丹皮50g，捣碎并置于1000ml圆底烧瓶加水浸泡12h，连接好提取装置，选用恒温电热套进行加热提取，收集提取液静置12h，抽滤，置于室温晾干，称重。
2.2 加盐种类及浓度实验
提取方法：本实验采用水蒸气蒸馏法，取牡丹皮50g，捣碎并置于1000ml圆底烧瓶加一定浓度盐溶液浸泡12h，连接好提取装置，选用恒温电热套进行加热提取，收集提取液静止12h，抽滤，置于室温晾干，称重。
（1）Nacl浓度依次为：1%；2%；3%；4%；5%；6%
（2）Na2SO4浓度依次为：1%；2%；3%；4%；5%；6%
2.3超声辅助提取条件的实验
提取方法：本实验采用水蒸气蒸馏法，取牡丹皮50g，捣碎并置于1000ml圆底烧瓶加水浸泡12h，置于不同条件下的超声波清洗器进行清洗后，连接好提取装置，选用恒温电热套进行加热提取，收集提取液静止12h，抽滤，置于室温晾干，称重。
3 结果与分析
3.1 优化水蒸气蒸馏法条件实验结果
由表4可知，影响提取效果的顺序依次为B（提取时间）>C（提取次数）>A（加水量），根据各因素对应的K1，K2，和K3（各取最大值）推断得理论最佳提取工艺为A1B3C1，即提取时间3h，提取次数1次，加水量12倍。
3.2加盐种类及浓度实验结果分析
由图1可知，丹皮酚的量随着Nacl的增加，1%到4%时丹皮酚的量都不变，5%时丹皮酚含量最高，而后不变。 （2）加入Na2SO4
由图2可知，丹皮酚的量随着Na2SO4含量增加先增大后减小，当Na2SO4含量为3%时丹皮酚的量最大，而后开始减少。
3.3 超声辅助提取条件实验结果分析
由直观分析表可知，影响提取效果的顺序依次为C（超声功率）>A（超声时间）>B（超声温度），根据各因素对应的K1，K2，和K3（各取最大值）推断得理论最佳提取工艺为C1A1B2，即超声功率80W，时间10min，温度30°最佳。
4 结论
本论文在单因素试验的基础上开展正交试验，通过实验测定，丹皮酚的最佳提取工艺为Na2SO4加入量为药材量的3%，超声功率80W，超声时间10min，超声温度30°的辅助条件下，加12倍水，提取时间3h，提取1次。与其他实验研究者研究结论相比较，虽然有一定的提高，但提高效果并不明显。
参考文献：
[1] 钟继昌，戴敏，潘礼龙.丹皮酚对ox-LDL誘导的大鼠血管内皮细胞黏附功能的抑制作用[J].安徽中医学院学报，2007，26（6）：31-34.
[2] 杨骅，马继琴，韩志云，等.丹皮酚对急性微循环障碍大鼠血管内皮细胞分泌的ET-1和NO的调控[J].海峡药学，2008，20（6）：47-49.
[3] 戴敏，刘青云，訾晓梅.丹皮酚对高脂血症大鼠动脉内皮细胞的保护作用[J].中国中医基础医学杂志，2001，7（2）：38-40.
[4] 王腾，唐其柱，江洪，等.丹皮酚对豚鼠心肌细胞动作电位及钙通道电流的影响[J].武汉大学学报：医学版，2001，22（4）：331-333.
[5] 吴晓慧，吴国荣，张卫明，等.丹皮酚及其磺化物体外抗氧化作用[J].南京师范大学学报：自然科学版，2005，28（3）：83-85.
[6] 刘春云，武延章，周大喜.凤丹丹皮酚抗菌作用的研究[J].生物学杂志，2000，17（3）：23-24.
[7] 杜凡，李惠芬，王宇歆，等.牡丹皮中丹皮酚、总苷、多糖单用及合用后的协同抑菌作用考查[J].天津药学，2008，20（2）：10-12.
[8] 武海军，徐继辉，李月玲，等.丹皮酚的抗炎作用研究[J].包头医学院学报，2008，24（3）：238-239.
（作者单位：陕西国际商贸学院）