【摘 要】
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目的:探索PDGF-BB是否可以通过外泌体传递,并且验证其在人骨肉瘤中的促血管新生的功能.方法:分离多种人骨肉瘤细胞中的外泌体,WB法检测PDGF-BB在人骨肉瘤细胞及其外泌体中的
【机 构】
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海南医学院第二附属医院创伤外科,海南海口 570311;海南医学院海南省肿瘤发生与干预重点实验室,海南海口 571199
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目的:探索PDGF-BB是否可以通过外泌体传递,并且验证其在人骨肉瘤中的促血管新生的功能.方法:分离多种人骨肉瘤细胞中的外泌体,WB法检测PDGF-BB在人骨肉瘤细胞及其外泌体中的表达,将骨肉瘤SJSA-1细胞来源的外泌体与HUVEC共孵育,免疫荧光和激光共聚焦扫描显微镜观察外泌体PDGF-BB进入细胞的方式;慢病毒感染法分别构建PDGF-BB过表达或敲低的SJSA-1细胞系,将其分离出的外泌体与HUVEC共孵育,微管形成实验检测其对血管新生的影响;构建SJSA-1细胞裸鼠移植瘤模型,回输过表达或敲低PDGF-BB的SJSA-1细胞来源的外泌体,观察其对肿瘤生长的影响.结果:成功分离出骨肉瘤细胞外泌体,并证实其携带大量的PDGF-BB,可通过细胞内吞进入HUVEC.成功构建PDGF-BB过表达或敲低的SJSA-1细胞系,并分离出携带相应水平PDGF-BB的外泌体,与对照组相比,PDGF-BB含量高的外泌体可以显著促进HUVEC的血管生成(P＜0.01,t=13.51)和移植瘤生长(P＜0.01),而PDGF-BB含量低的外泌体促血管生成能力减弱(P＜0.01,t=8.226)并抑制移植瘤的生长(P＜0.01).结论:骨肉瘤细胞分泌的外泌体PDGF-BB可以直接被HUVEC摄取,诱导肿瘤血管生成,从而促进骨肉瘤生长.
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